Ang-(1-7)對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)talin1表達(dá)的影響及機(jī)制探討.pdf

1、腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system，RAS)是人體內(nèi)最重要的調(diào)節(jié)系統(tǒng)之一，在心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。整合素(Integrins)是細(xì)胞表面受體的主要家族，介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的粘附，活化的整合素αⅡbβ3與血栓形成關(guān)系密切。踝蛋白(talin1)作為活化αⅡbβ3的要素，近年來備受關(guān)注。實(shí)驗(yàn)室前期工作證實(shí):血管緊張素-（1-7）[Angiotensin-(1-7)，Ang-(1-7)]能顯

2、著抑制血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)性（微）血栓形成，但Ang(1-7)和AngⅡ能否通過影響talin1的表達(dá)來影響血小板的活化，目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)將觀察Ang(1-7)對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)talin1的影響，并初步探討其作用機(jī)制。
　　 目的：觀察Ang-(1-7)對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(humanumbilical vein endothelial cells，HUV

3、ECs)表達(dá)talin1的影響，初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法：HUVECs細(xì)胞的培養(yǎng)采用DMEM完全培養(yǎng)基，第一部分實(shí)驗(yàn)分組設(shè)置:不同濃度AngⅡ（10-10～10-6mol/L）組， AngⅡ作用不同時(shí)間(0、2、4、6、8、10、12 h)組， AngⅡ+不同濃度Ang(1-7)（10-9～10-6mol/L）組，AngⅡ+Ang(1-7)作用不同時(shí)間(0、2、4、6、8、10、12 h)組;第二部分實(shí)驗(yàn)分組設(shè)置:對(duì)照組

4、、AngⅡ組、Ang(1-7)組、PDTC組、AngⅡ+Ang(1-7)組、AngⅡ+ Ang(1-7)+PDTC組。用ELISA法檢測talin1抗原， RT-PCR法檢測talin1 mRNA。
　　 結(jié)果：①與對(duì)照組比較，AngⅡ呈劑量依賴性地促進(jìn)HUVECs細(xì)胞表達(dá)talin1抗原(r=0.965，P＜0.05)，mRNA增加（P＜0.05），10-7mol/L達(dá)最大作用濃度;AngⅡ呈時(shí)間依賴性地促進(jìn)HUVECs細(xì)胞表

5、達(dá)talin1抗原，在作用4h時(shí)表達(dá)出現(xiàn)峰值（P＜0.01）。②單獨(dú)使用Ang-(1-7)，對(duì)HUVECs細(xì)胞表達(dá)talin1沒有影響，但在給予AngⅡ之前30 min，用Ang-(1-7)（10-9～10-6 mol/L）預(yù)處理HUVECs細(xì)胞后，AngⅡ促進(jìn)HUVECs細(xì)胞表達(dá)talin1的作用受到明顯抑制，并存在顯著的量-效抑制關(guān)系(r=-0.987，P＜0.05)，在濃度為10-6 mol/L時(shí)，其抑制作用最強(qiáng);且抑制作用在4h

6、最為明顯（P＜0.01）。③與對(duì)照組比較，單獨(dú)使用NF-κB抑制劑PDTC，對(duì)HUVECs細(xì)胞表達(dá)talin1抗原和mRNA沒有影響，但是PDTC可明顯抑制Ang-(1-7)拮抗AngⅡ促進(jìn)talin1抗原及talin1 mRNA增加的作用（P＜0.05）。
　　 結(jié)論：①在mRNA水平上，AngⅡ以時(shí)間依賴性和劑量依賴性方式誘導(dǎo)HUVECs細(xì)胞表達(dá)talin1。②在mRNA水平上，Ang-(1-7)對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)HUVECs細(xì)