日本血吸蟲ARG和p50 IP基因的克隆及其結構與功能研究.pdf

1、研究目的擴增Sj ARG和Sj p50 IP基因全長的cDNA和DNA序列,分析cDNA和DNA序列之間的不同,擴增ARG基因的啟動子序列,實驗鑒定ARG基因序列的完整性;研究重組蛋白ARG和p50 IP的生物學活性,包括免疫原性、免疫反應性,組織分布及酶活性等;以Sj 26 GST為陽性對照,研究ARG和p50 IP等作為疫苗的保護性效果及可能機制.結論[1]識別并擴增得到了SjARG和Sjp50 IP二個基因的全長DNA和cDNA序

2、列:SjARG基因cDNA序列全長編碼區(qū)為1164bp,其DNA序列無內含子,其起始密碼子前-32位為TATA盒;Sjp50 IP基因cDNA序列全長編碼區(qū)為1275bp,其DNA編碼區(qū)序列中有六個內含子,DNA序列全長1486bp.[2]發(fā)現純化的Sj ARG重組蛋白具有與Sj天然蛋白相同的免疫原性和免疫反應性;免疫組化顯示ARG定位于日本血吸蟲成蟲的生殖器、腸管;酶學分析顯示,重組ARG具有酶的活性,在37℃、pH9.5時,酶活性單

3、位為35.47 U/mg,Km值為8.465×10-3mol/L;動物免疫效果顯示,SjARG具有比GST更好的減蟲和減卵效果,特別是SjARG先DNA免疫再蛋白質免疫組,其減蟲率、減卵率高達63.9％、97.9%,可能是理想的疫苗候選分子.[3]發(fā)現純化的Sj p50 IP重組蛋白具有與Sj天然蛋白相同的免疫原性和免疫反應性;免疫組化顯示p50 IP定位于日本血吸蟲成蟲的皮層;動物免疫效果顯示,p50 IP各組也顯示了較高的減蟲、減卵