改良法大鼠急性硬膜下血腫模型建立及自然轉(zhuǎn)歸的實驗研究.pdf

1、目的:通過改良的實驗方法,建立穩(wěn)定、高效的大鼠急性硬膜下血腫模型,并探討硬膜下血腫自然轉(zhuǎn)歸過程中的相關(guān)病理生理學(xué)機制及其影響因素。
　　 方法:本實驗共采用成年雄性Wistar大鼠150只,分別用兩種不同造模方法建立急性硬膜下血腫模型。傳統(tǒng)造模法共取25只,進一步分為對照組5只,實驗組20只,傳統(tǒng)造模法采用去除顱骨開骨窗、顯微鏡下操作切開硬膜置入注血針頭并封膠固定,一次性注入非抗凝自體血300微升,造模后第2天、6天分別處死10

2、只；處死大鼠后取顱內(nèi)組織行HE染色形態(tài)學(xué)觀測。
　　 改良造模法共取大鼠125只,進一步分為對照組5只,實驗組120只,采用磨鉆開骨窗、顱骨內(nèi)嵌入聚乙烯塑料軟管的方法一次性硬膜下注入非抗凝自體血300微升,建立急性硬膜下血腫模型,分別于模型制備前、后對各組實驗動物進行行為學(xué)評分,同時應(yīng)用核磁成像技術(shù)動態(tài)觀察血腫轉(zhuǎn)歸情況與腦皮質(zhì)損傷程度,于造模后第2天、4天、6天、8天、10天和14天各處死20只,分別應(yīng)用HE病理染色觀察血腫、血

3、腫周圍新生包膜組織以及腦皮質(zhì)的病理學(xué)改變；CD31血管免疫組織化學(xué)染色檢測血腫新生包膜內(nèi)的新生血管數(shù)量及結(jié)構(gòu)特征；電子透射顯微鏡觀察血腫新生包膜及包膜內(nèi)新生血管情況。
　　 結(jié)果:采用傳統(tǒng)造模方法進行模型制備的平均成功率為15.00％(3/20只),失敗率55.00％(11/20只),死亡率30.00％(6/20只),改良造模方法進行模型制備的平均成功率為73.33％(88/120只),失敗率11.67％(14/120只),死亡

4、率15.00％(18/120只)。模型制備成功大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分、HE染色、CD31免疫組化染色檢測、電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察及MRI影像學(xué)觀測時,可見血腫位于硬膜下腔,血腫下腦皮質(zhì)局部形成缺血、水腫損傷灶；血腫周圍可見新生血腫包膜包裹,包膜形成早期(≤4天)包膜壁大量炎性細(xì)胞浸潤并伴竇狀血管腔形成,但新生血管密度變化不明顯；至晚期血管逐漸趨于成熟,包膜新生血管密度與模型制備第2天相比明顯增加,且于第8天血管密度達(dá)峰值,之后隨著包膜的消退,新生

5、血管密度逐漸降低；模型制備第8天,血腫體積明顯減小,至第14天左右血腫基本吸收,血腫體積的變化呈現(xiàn)非線性變化過程,且血腫體積與包膜新生血管密度呈負(fù)相關(guān)；神經(jīng)功能缺損程度隨著時間的延長有明顯恢復(fù)。模型制備失敗大鼠無典型血腫包膜結(jié)構(gòu)形成,血腫塊早期消失,皮質(zhì)損傷嚴(yán)重。兩種造模方法的實驗對照組大鼠皮質(zhì)未見明顯損傷灶。
　　 結(jié)論:經(jīng)改良的大鼠急性硬膜下血腫模型與傳統(tǒng)模型相比,硬膜下血腫特征明顯、操作方法簡單,造模成功率高。造模時合并的