TFPI-2和SNCG在食管癌中的表達及其與食管癌浸潤、轉移和細胞凋亡之間的關系.pdf

1、背景與目的
　　 食管癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,在我國食管癌的死亡率居惡性腫瘤的第四位,而浸潤與轉移是導致患者死亡的主要因為。食管癌的浸潤和轉移是一個多基因參與通過多步驟和多階段完成的復雜過程。目前認為惡性腫瘤的浸潤轉移與細胞外基質的水解密切相關,基質中蛋白酶與蛋白酶抑制劑之間的平衡狀態(tài)直接影響腫瘤的生物學特性,基質中蛋白酶的增加或蛋白酶抑制劑的減少,將導致細胞外基質及基底膜的水解和破壞,促進食管癌的浸潤和轉移。

2、　　 組織因子途徑抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)-2又稱胎盤蛋白(placental protein,PP)-5,與TFPI是同系物,是Kunitz型絲氨酸蛋白酶抑制物家族的成員,可抑制包括基質金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)、胰蛋白酶、纖溶酶在內的多種酶類,而MMPs參與了細胞外基質的重塑,在纖維蛋白溶解、動脈粥樣硬化、傷口愈合及腫瘤細胞的浸

3、潤轉移和血管新生等生理病理過程中發(fā)揮重要作用。越來越多的研究表明TFPI-2能明顯抑制腫瘤中MMPs的活性與功能,通過維持細胞外基質的完整、調控腫瘤細胞的凋亡及調節(jié)腫瘤血管生成等機制來控制惡性腫瘤細胞的侵襲和轉移。
　　 Y-Synuclein(SNCG)是神經突觸核蛋白家族中的一員,在正常生理狀態(tài)下,具有明顯的組織特異性,主要分布在神經系統(tǒng)中。γ-Synuclein最早發(fā)現(xiàn)于人乳腺癌cDNA文庫,被稱為乳腺癌特異基因(brea

4、st cancer specific gene,BCSG1),目前其作為腫瘤標志物已經在乳腺癌中廣泛研究,近年來在胃癌、胰腺癌和肝癌等消化系統(tǒng)腫瘤中也發(fā)現(xiàn)γ-Synuclein的表達異常增高,尤其在晚期腫瘤中更為明顯。此外,γ-Synuclein能夠增加腫瘤細胞的侵襲轉移能力和對化療藥物的耐藥性,使得γ-Synuclein有可能成為新的腫瘤標志物和治療靶點。
　　 本研究通過在蛋白水平檢測TFPI-2和SNCG在食管癌、癌旁組織

5、及正常食管黏膜組織中的表達情況及其與MMP-9及細胞凋亡之間的關系,進而探討TFPI-2和SNCG在食管癌浸潤和轉移中的作用,為食管癌的治療及預后判斷提供新的參考依據(jù)。
　　 材料與方法(1)標本收集于安陽腫瘤醫(yī)院2008年12月-2009年2月行食管癌手術切除并經病理證實的癌組織標本82例、不典型增生組織20例和正常組織54例,經10％的福爾馬林液固定后,常規(guī)脫水,石蠟包埋。(2)應用免疫組織化學法檢測82例食管癌組織及其相應

6、20例癌旁不典型增生組織和54例正常食管組織中TFPI-2、SNCG和MMP-9的表達,應用TUNEL法檢測腫瘤細胞的凋亡并計算凋亡指數(shù)(apoptosis index,AI)。(3)應用SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計分析,實驗數(shù)據(jù)行t檢驗、x2檢驗及pearson相關分析,組間兩兩比較采用卡方分割法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 (1)TFPI-2的檢測結果:TFPI-2的陽性表達定位于細胞質和細

7、胞膜,食管癌、癌旁不典型增生和正常食管組織中TFPI-2的陽性表達率分別為30.487％、60.000％和87.037％,3組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。食管癌高分化組、無外膜浸潤組、無淋巴結轉移組和TNMⅠ-Ⅱ期組TFPI-2的陽性表達率分別為48.000％、47.826％、47.619％、44.000％均高于中低分化組22.807％、侵及外膜組23.729％、有淋巴結轉移組12.500％和TNMⅢ-Ⅳ期組9.375％,且差異

8、有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。而與患者的年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及大體分型無關(P＞0.05)。
　　 (2)SNCG的檢測結果:SNCG的陽性表達定位于細胞質和(或)細胞核,食管癌、癌旁不典型增生和正常食管組織中SNCG的陽性表達率分別為63.414％、30.000％和3.703％,3組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。食管癌高分化組、無外膜浸潤組、無淋巴結轉移組和TNMⅠ-Ⅱ組SNCG的陽性表達率分別為44.000％

9、、30.435％、47.619％、48.000％均低于中低分化組71.930％、侵及外膜組76.271％、有淋巴結轉移組80.000％和TNMⅢ-Ⅳ期組87.500％,且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。而與患者的年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及大體分型無關(P＞0.05)。
　　 (3)MMP-9的檢測結果:MMP-9的陽性表達定位于細胞質,食管癌、癌旁不典型增生和正常食管組織中MMP-9的表達陽性率分別為71.951％、40

10、.000％和11.111％,3組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。食管癌高分化組、無外膜浸潤組、無淋巴結轉移組和TNMⅠ-Ⅱ期組MMP-9的陽性表達率分別為56.000％、43.478％、54.762％、60.000％均低于中低分化組78.947％、侵及外膜組83.051％、有淋巴結轉移組90.000％和TNMⅢ-Ⅳ期組90.625％,且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。而與患者的年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及大體分型無關(P＞0.

11、05)。
　　 (4)食管癌組織中TFPI-2與MMP-9的關系:82例食管癌組織中TFPI-2與MMP-9的共陽性表達占4例,共陰性表達占2例,經Pearson相關分析TFPI-2與MMP-9的表達呈負相關(r=0.636,P=0.000)(P<0.05)
　　 (5)食管癌組織中SNCG與MMP-9的關系:82例食管癌組織中SNCG與MMP-9的共陽性表達占45例,共陰性表達占16例,經Pearson相關分析SNCG

12、與MMP-9的表達呈正相關(r=0.393,P=0.000)(P<0.05)
　　 (6)食管癌組織申TFPI-2與SNCG之間的關系:82例食管癌組織中TFPI-2與SNCG的共陽性表達占12例,共陰性表達占17例,經Pearson相關分析發(fā)現(xiàn),TFPI-2與SNCG的表達無相關關系(r=0.207,P=0.055)(P>0.05)
　　 (7)TFPI-2、SNCG與細胞凋亡之間的關系:TFPI-2陽性表達的食管癌組

13、織其細胞凋亡指數(shù)(AI)(8.125±2.139)高于陰性表達者(4.861±2.584),差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；SNCG陽性表達的食管癌組織其細胞凋亡指數(shù)(4.423±2.689)低于陰性表達者(7.100±2.918),差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 (1)TFPI-2在食管癌組織中的陽性表達率明顯低于在正常食管黏膜組織和癌旁組織中的表達,TFPI-2的低表達與淋巴結轉移、浸潤深度

14、、TNM分期和分化程度密切相關,但與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、腫瘤大體分型無關,TFPI-2為抑癌基因,其低表達可能參與了食管癌的發(fā)生、發(fā)展。
　　 (2)SNCG在食管癌組織中的陽性表達率明顯高于在正常食管黏膜組織和癌旁組織中的表達,SNCG的高表達與淋巴結轉移、浸潤深度、TNM分期和分化程度密切相關,但與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、腫瘤大體分型無關,SNCG為癌基因,其高表達可能參與了食管癌的發(fā)生、發(fā)展。<

15、br>　　 (3)MMP-9在食管癌組織中的陽性表達率明顯高于在正常食管黏膜組織和癌旁組織中的表達,MMP-9的高表達與淋巴結轉移、浸潤深度、TNM分期和分化程度密切相關,但與患者年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、腫瘤大體分型無關,其高表達參與了食管癌的浸潤、轉移。
　　 (4)TFPI-2與MMP-9的表達呈負相關,提示TFPI-2通過抑制MMP-9,降低對細胞外基質的破壞,保持基質和基底膜的完整,抑制食管癌的浸潤及轉移。