原子力顯微鏡(AFM)對(duì)霍奇金淋巴瘤HRS細(xì)胞16種抗體結(jié)合的觀察.pdf

1、目的:應(yīng)用AFM直接觀察HRS細(xì)胞與抗體結(jié)合后的細(xì)胞表面抗體顆粒的變化,揭示HRS細(xì)胞來(lái)源的線索。
　　方法:用10％福爾馬林蒸汽固定法對(duì)17種常用抗體進(jìn)行固定,并在AFM下掃描,觀察各抗體形態(tài)。將手術(shù)取出的HL病人的新鮮淋巴結(jié)組織進(jìn)行印片,將17種抗體分別在印片上滴加,按常規(guī)免疫組化染色的步驟至顯色前水洗后室溫干燥后,置于AFM下觀察掃描,應(yīng)用AFM的Tapping模式對(duì)抗體結(jié)合后的HRS細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行掃描,獲得清晰的圖像,

2、應(yīng)用AFM軟件分析系統(tǒng)測(cè)量和分析細(xì)胞膜表面的顆粒數(shù)目,得出計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果:1、所選病例為經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤,混合細(xì)胞型。
　　2、 HRS細(xì)胞與17種抗體結(jié)合后細(xì)胞表面的顆粒數(shù)目在3-46個(gè)之間。其中3個(gè)顆粒:印片無(wú)抗體(陰性對(duì)照)、CK、CD38;5個(gè)顆粒:CD3;6個(gè)顆粒:CD20、CD30;9個(gè)顆粒:CD5、CD10;13個(gè)顆粒:CD35;14個(gè)顆粒:CD15、CD163;16個(gè)顆粒:bcl-2;17個(gè)顆粒:PAX-

3、5;23個(gè)顆粒:MUM-1;24個(gè)顆粒:LCA;34個(gè)顆粒:CD21;46個(gè)顆粒:CD68。
　　結(jié)論:應(yīng)用AFM掃描的17種抗體與HRS細(xì)胞結(jié)合后的細(xì)胞表面形態(tài),其抗體顆粒數(shù)目可分為3類:少顆粒(10個(gè)以下)、中顆粒(11-20個(gè))、多顆粒(21個(gè)以上)。這在形態(tài)上直觀地印證了HRS細(xì)胞與不同抗體結(jié)合的多態(tài)性。
　　HRS細(xì)胞可與B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、組織細(xì)胞的抗體不同程度的結(jié)合,提示HRS細(xì)胞具有多種淋巴造