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1、目的:探討類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血單核細(xì)胞(peripheral blood monocytes)中高遷移率族蛋白-1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)的釋放和細(xì)胞內(nèi)定位及沙利度胺(Thalidomide,商品名:反應(yīng)停)對(duì)其的影響。 方法:RA患者19例及年齡性別匹配的正常對(duì)照20例,分別抽取外周靜脈血5ml
2、,F(xiàn)icoll密度梯度離心法分離外周血單核細(xì)胞,分別用100ng/mlTNF-α或100ng/mlTNF-α加40 μg/ml沙利度胺處理細(xì)胞后,放入在37℃、體積分?jǐn)?shù)為5﹪的CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí),收集細(xì)胞培養(yǎng)液的上清,Western Blot檢測(cè)HMGB1的表達(dá);另采用細(xì)胞免疫熒光法觀察培養(yǎng)的外周血單核細(xì)胞中HMGB1的胞內(nèi)定位。 結(jié)果: RA組外周血單核細(xì)胞培養(yǎng)液的上清中HMGB1的蛋白水平比健康對(duì)照組顯著增高(
3、P<0.05);100ng/ml TNF-α加40 μ g/ml沙利度胺處理的RA患者外周血單核細(xì)胞培養(yǎng)液的上清中HMGBl的表達(dá)較100ng/ml TNF-α刺激的細(xì)胞明顯下降(P<0.05),100ng/mlTNF-α刺激RA患者的外周血單核細(xì)胞24小時(shí)后培養(yǎng)液的上清中HMGBl的表達(dá)與未加任何刺激因子組比較沒(méi)有顯著差異。RA患者外周血單核細(xì)胞中HMGB1主要表達(dá)于胞核,100ng/mlTNF-α刺激外周血單核細(xì)胞24小時(shí)后HMGB
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