霉茶提取物對大鼠血管功能影響及機制研究.pdf

1、目的：
　　對霉茶乙醇提取物不同極性洗脫部位進行離體血管實驗研究得到霉茶血管藥效活性部位。利用正常大鼠離體胸主動脈環(huán)和原發(fā)性高血壓（SHR）大鼠作研究材料，借助分子生物學實驗技術研究霉茶提取物對血管結構和功能的影響，并探索其作用機制。以期為霉茶資源的合理開發(fā)利用提供理論和實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.霉茶提取物對離體血管環(huán)活性部位篩選
　　首次對霉茶乙醇提取物不同極性提取部位進行離體血管環(huán)實驗研，觀察霉茶乙醇提

2、取物甲醇部位、乙酸乙酯部位、丙酮部位、石油醚部位及氯仿部位對去甲腎上腺素（NA）所致的縮血管反應的影響。
　　2.霉茶黃酮類成分對離體血管環(huán)的作用
　　對霉茶乙酸乙酯部位離體血管環(huán)作用活性追蹤,以離體大鼠胸主動脈血管環(huán)為研究對象，經(jīng)生物信號采集系統(tǒng)記錄血管環(huán)張力變化，觀察霉茶總黃酮、二氫楊梅素、楊梅素對血管基礎張力的影響以及對NA所致的縮血管反應的影響，并觀察二氫楊梅素與楊梅素不同濃度合用的協(xié)同作用。
　　3.霉茶總黃

3、酮對原發(fā)性高血壓大鼠（SHR）血管舒張功能及重塑的影響
　　將50只SHR大鼠隨機分為模型組、總黃酮低劑量組（90 mg·kg-1）、總黃酮中劑量組（180 mg·kg-1）、總黃酮高劑量組（360 mg·kg-1）和復方羅布麻片組（50 mg·kg-1），每天灌胃給藥2次，連續(xù)灌胃7周。尾動脈無創(chuàng)測壓法觀察大鼠血壓變化，HE染色測定胸主動脈形態(tài)學指標，離體血管張力測定法檢測胸主動脈舒張功能反應性，硝酸還原法檢測血清NO含量，Re

4、al-Time PCR測定胸主動脈組織eNOS、ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2、P27基因的表達。
　　結果：
　　1.霉茶提取物乙酸乙酯部位能使NA縮血管的量-效曲線非平行右移并使NA縮血管效能（Emax）降低，而其它霉茶提取部位無顯著拮抗NA收縮效應。2.乙酸乙酯部位的主要化學成分霉茶總黃酮、二氫楊梅素、楊梅素均可濃度依賴性增加血管環(huán)靜息張力；霉茶總黃酮能使NA縮血管的量-效曲線非平行右移并降低其Emax；二氫

5、楊梅素、二氫楊梅素與楊梅素的混合物有與霉茶總黃酮相似的效應且霉茶總黃酮作用強于二氫楊梅素、二氫楊梅素與楊梅素的混合物；二氫楊梅素與楊梅素合用使 NA收縮血管的Emax降低，明顯強于二者單獨使用；當二氫楊梅素與楊梅素濃度比為10:1時，拮抗NA縮血管的效應最佳。
　　3.霉茶總黃酮可以抑制SHR大鼠血壓隨自然病程的上漲，中、高劑量總黃酮能明顯降低血管中膜厚度，且高劑量總黃酮能明顯降低血管中厚度與管腔直徑比；可以劑量依賴性的改善離體

6、SHR大鼠胸主動脈環(huán)對Ach誘導的血管舒張反應，對SNP誘導的血管舒張反應作用無顯著差異；中、高劑量總黃酮能明顯能上調血管組織中eNOS基因，升高血清中NO含量；霉茶總黃酮各劑量均能下調血管組織中ACE、AngⅡ、C-myc、Bcl-2基因同時上調P27基因表達。
　　結論：
　　1.霉茶乙醇總提取物的乙酸乙酯洗脫部位有較強的血管調節(jié)作用，能抑制NA收縮血管反應，為離體血管環(huán)有效活性部位。
　　2.霉茶乙醇總提取物的乙

7、酸乙酯部位主要成分總黃酮對血管基礎張力有劑量依賴性收縮作用但能明顯拮抗NA縮血管效應且作用強于二氫楊梅素、二氫楊梅素與楊梅素的混合物；二氫楊梅素與楊梅素對抑制NA誘導血管收縮反應有協(xié)同增效作用且最佳協(xié)同比例為霉茶總黃酮中原始比例（即10:1）。
　　3.霉茶總黃酮能緩解高血壓癥狀，改善高血壓引起的血管舒張功能失調和血管重塑。上調胸主動脈eNOS基因表達水平，增加NO的合成有關。其抑制高血壓引起的血管重塑作用可能與調節(jié)RAS系統(tǒng)相關