沉默Notch-1對膀胱癌EMT影響的體外研究.pdf

1、類號：密級：UDC：學號：416523212122南昌大學碩士研究生學位論文沉默沉默Notch1對膀胱癌對膀胱癌EMT影響的影響的體外研究體外研究EffectofNotch1SilencingonEpithelialmesenchymalTransfmationwithBladderCancerinVitro劉仁升劉仁升培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱：傅斌教授、主任醫(yī)師申請學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：外

2、科學（泌尿外科）論文答辯日期：2015年6月答辯委員會主席：評閱人：2015年4月摘要II摘要目的：目的：體外實驗探討沉默Notch1受體對膀胱癌EMT的影響及分子機制。方法：方法：將Notch1shRNA及陰性對照組用Lip2000轉(zhuǎn)染膀胱癌5637細胞株，倒置顯微鏡下觀察5637細胞生長狀態(tài)以及形態(tài)的變化，并且觀察轉(zhuǎn)染效率；運用qRTPCR及westernblot檢測轉(zhuǎn)染效率；qRTPCR及westernblot技術(shù)檢測Ecadhe

3、rin、Ncadherin、vimentin的mRNA及蛋白表達變化；流式細胞儀檢測凋亡率變化情況；transwell評估5637細胞侵襲能力的改變。結(jié)果：結(jié)果：實驗組培養(yǎng)的膀胱癌細胞數(shù)量明顯下降，細胞之間的連接減少，分布更分散，細胞皺縮、變小，熒光顯示轉(zhuǎn)染效率為80%；qRTPCR及westernblot檢測轉(zhuǎn)染效率結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染Notch1shRNA細胞，Notch1的mRNA和蛋白表達顯著性下調(diào)（P＜0.05）；qRTPCR及we

4、sternblot檢測EMT標記物的結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染Notch1shRNA后，vimentin的mRNA及蛋白表達顯著下調(diào)（Ρ0.05），Ecadherin、Ncadherin的mRNA及蛋白表達顯著上調(diào)（Ρ0.05）；流式細胞術(shù)結(jié)果顯示:實驗組的早、中晚期凋亡率均顯著上調(diào)，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；transwell表明轉(zhuǎn)染Notch1shRNA細胞的侵襲能力顯著下調(diào)（P＜0.05）。結(jié)論：結(jié)論：通過沉默Notch1受體部分