HER-1-HER-2在膀胱癌中的表達及阿法替尼對膀胱癌T24細胞影響的實驗研究.pdf

1、第一章膀胱癌組織HER-1/HER-2的表達及其臨床意義
　　 目的：研究膀胱移行細胞癌中HER-1和HER-2的表達情況，探討HER-1和HER-2的表達與腫瘤的分期、病理分級等臨床參數(shù)的關系。
　　 方法：采用免疫組化染色的方法研究56例膀胱移行細胞癌的手術腫瘤標本以及10例正常膀胱組織標本的HER-1和HER-2的表達，并進行分析研究HER-1和HER-2在膀胱腫瘤中的表達是否存在相關性，同時采用統(tǒng)計學分析HER-

2、1和HER-2的表達與與腫瘤分期、病理分級等臨床參數(shù)之間的關系
　　 結(jié)果：56例膀胱移行細胞癌患者的HER-1表達陽性率為55.4％，明顯高于正常膀胱組織中HER-1的陽性率(10％);HER-2在膀胱腫瘤的表達陽性率為37.5％，也明顯高于正常膀胱組織中HER-1的陽性率(0％)。HER-1和HER-2在膀胱癌組織中的表達為正相關性。HER-1在高分期腫瘤(T3-T4)中的陽性率顯著高于低分期腫瘤(T1-T2)(67.6％

3、vs.36.4％)，在高分級腫瘤(G3)中的陽性率顯著高于低分期腫瘤(G1-G2)(72.7％ vs.30.4％)，在復發(fā)者中的陽性率顯著高于初發(fā)組(75.0％ vs.29.2％)。HER-2在高分期腫瘤(T3-T4)中的陽性率顯著高于低分期腫瘤(T1-T2)(52.9％ vs.13.6％)，在復發(fā)者中的陽性率顯著高于初發(fā)組(53.1％ vs.16.7％)。
　　 結(jié)論：HER-1和HER-2均在膀胱移行細胞癌中表達異常增加，其

4、兩者的表達為正相關性。HER-1的表達與膀胱尿路上皮癌的臨床分期、病理分級、腫瘤復發(fā)相關。HER-2的表達與膀胱尿路上皮癌的臨床分期和腫瘤復發(fā)相關。
　　 第二章 HER-1和HER-2雙重酪氨酸激酶抑制劑Afatinib對膀胱癌T24細胞生物學行為的影響
　　 目的：研究Afatinib對T24細胞增殖、凋亡和侵襲能力的影響。
　　 方法：采用不同濃度的Afatinib（0，1，5，10，20 umol/L）作

5、用T24細胞，用MTT法研究Afatinib對T24細胞的增殖能力的影響;用流式細胞術(FCM)檢測Afatinib對人膀胱癌T24細胞凋亡的影響;用細胞粘附實驗檢測Afatinib對人膀胱癌T24細胞對FN粘附的影響;用Transwell實驗研究Afatinib對T24細胞的侵襲能力的影響;同時用western blot檢測了侵襲相關蛋白MMP-2與MMP-9表達及凋亡相關蛋白Bcl-2與Bax的表達，通過檢查ERK1/2和Akt探討

6、Afatinib作用于膀胱癌的機制。
　　 結(jié)果：Afatinib對膀胱癌T24細胞的增殖能力有著抑制作用;對T24細胞有著促進凋亡的作用，并且能改變T24細胞Bcl-2與Bax蛋白含量之比; Afatinib對膀胱癌T24細胞的侵襲能力有著抑制的作用，能抑制T24細胞MMP-2及MMP-9蛋白的表達;Afatinib作用于膀胱癌T24細胞后，p-ERK1/2和p-Akt蛋白呈下降趨勢，且呈劑量依賴性;而對T24細胞的t-ERK

7、1/2和t-Akt蛋白無影響。
　　 結(jié)論：Afatinib抑制了T24細胞的增殖和侵襲能力，促進了T24細胞的凋亡。
　　 第三章 Afatinib對膀胱癌T24細胞順鉑化療敏感性研究
　　 目的探：討Afatinib與順鉑聯(lián)合應用于膀胱癌細胞的協(xié)同作用，并對其作用機制及耐藥性進行初步探討。
　　 方法：先進行膀胱癌T24-ADM細胞的制備，用MTT法觀察Afatinib聯(lián)合順鉑對T24細胞增殖的抑制作

8、用;分別用MTT法檢測Afatinib作用前后順鉑對T24-ADM細胞增殖的抑制作用;PCR法檢測Afatinib作用前后順鉑對T24-ADM細胞MDR-1基因mRNA的表達水平;用western-blot法檢測Afatinib作用前后順鉑對T24-ADM細胞p-gP的表達水平。
　　 結(jié)果：Afatinib和順鉑聯(lián)合用藥的T24細胞的增殖抑制率高于單用順鉑;順鉑對Afatinib作用后的T24-ADM細胞抑制率高于Afatin