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文檔簡介
1、目的:察鞣花酸對人前列腺癌PC-3細胞株增殖抑制及誘導凋亡的作用,研究其對Caspase-3和NF-κB的表達的影響,探討鞣花酸對前列腺癌的作用及其可能機制,為鞣花酸的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 方法: 1.體外培養(yǎng)人前列腺癌PC-3細胞后,加入2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的鞣花酸作用于PC-3細胞,并設(shè)置陰性對照組(即0μg/ml組),作用12、24和48小時后,MTT法測定各濃度組鞣花酸
2、對PC-3細胞的生長抑制作用。 2.應(yīng)用流式細胞儀檢測不同濃度鞣花酸作用48小時后,PC-3細胞的周期時相變化及凋亡情況。 3.HE染色法觀察5ug/ml鞣花酸作用48小時后的細胞形態(tài)學變化。 4.免疫細胞化學檢測10ug/ml鞣花酸作用24小時后,實驗組與對照組細胞Caspase-3, NF-κB的蛋白表達變化情況。 結(jié)果: 1.MTT比色法結(jié)果顯示:各處理組藥物均能抑制PC-3細胞生長,鞣花酸
3、對PC-3細胞的抑制作用呈時間和劑量依賴性,與對照組比較均有統(tǒng)計學意義,不同濃度鞣花酸處理組之間的兩兩比較顯示也有統(tǒng)計學意義; 2.流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,鞣花酸可將PC-3細胞阻滯于G1/S期并誘導PC-3細胞凋亡,且其阻滯率及凋亡率隨著藥物濃度的增加而升高。 3.HE染色法結(jié)果顯示,5ug/ml鞣花酸作用48小時后,出現(xiàn)細胞變圓,皺縮,細胞核固縮,染色質(zhì)濃集,邊聚,核碎裂等細胞凋亡的形態(tài)學變化。 4.免疫細胞
4、化學結(jié)果顯示,10ug/ml鞣花酸作用于PC-3細胞24小時后,與對照組相比,實驗組Caspase-3蛋白表達明顯升高, NF-κB蛋白表達明顯降低。 結(jié)論: 1.鞣花酸對人前列腺癌細胞株P(guān)C-3的生長具有明顯的生長抑制作用,存在劑量和時間依賴關(guān)系。 2.鞣花酸可誘導前列腺癌PC-3細胞凋亡并可將前列腺癌細胞阻滯于G1/S期。 3.鞣花酸作用于PC-3細胞24小時后,細胞中Caspase-3蛋白表達明顯升
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