亞砷酸對人胰腺癌PANC-1細胞中RASSF1A的表達影響及其可能機制的探討.pdf

1、目的:
　　 本研究以人胰腺癌PANC-1細胞作為研究對象，采用不同濃度的亞砷酸處理人胰腺癌PANC-1細胞，觀察其對胰腺癌細胞增殖的影響；比較亞砷酸作用前后抑癌基因RASSF1A表達的變化，并探討亞砷酸引起該基因表達變化的可能機制，為胰腺癌新的治療方案提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 MTT法檢測亞砷酸對人胰腺癌PANC-1細胞增殖的影響。處理組用濃度為4.8μmol/L、2.4μmol/L、1.2μmol/

2、L的亞砷酸加入人胰腺癌PANC-1細胞中，空白對照組不加藥物，作用48h后，采用反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)檢測人胰腺癌PANC-1細胞中抑癌基因RASSF1A在亞砷酸處理前后mRNA水平的表達情況，采用甲基化特異性PCR(MSP)法檢測亞砷酸處理前后RASSF1A基因去甲基化的情況，用Quantity One軟件測量目的條帶灰度積值與內(nèi)參條帶灰度積值的比，進行半定量分析。
　　 結(jié)果:
　　 (1)亞砷酸對胰腺癌細胞生

3、長增殖的影響亞砷酸濃度在1.2μmol/L-4.8μmol/L濃度時，隨著作用時間的延長，細胞抑制率逐漸增加(P<0.05)；在作用時間相同時，隨著藥物濃度從1.2μmol/L到4.8μmol/L增加，抑制率也逐漸增加(P<0.05)。亞砷酸在一定濃度范圍內(nèi)對細胞增殖的抑制作用具有時間和劑量效應(yīng)。
　　 (2)亞砷酸對胰腺癌細胞中RASSF1A mRNA表達的影響半定量RT-PCR分析人胰腺癌PANC-1中抑癌基因RASSF1A

4、 mRNA的表達，結(jié)果表明亞砷酸處理人胰腺癌PANC-1細胞48h后，隨著亞砷酸作用濃度的增加，抑癌基因RASSF1A mRNA表達逐漸增強?？瞻讓φ战M和處理組之間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，不同處理組之間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。[3]亞砷酸處理前后RASSF1A的甲基化分析在細胞中，RASSF1A基因表現(xiàn)為高甲基化狀態(tài)，隨著亞砷酸作用濃度的增加，RASSF1A基因甲基化條帶的亮度逐漸減弱。但用亞砷酸作用48h后RA