LPS誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞Panc-1表達B7-H1機制的研究.pdf

1、背景：
　　 近年來腫瘤細(xì)胞表面表達的B7-H1分子和Toll樣受體(Toll-likereceptors，TLRs)與腫瘤免疫逃逸的關(guān)系倍受關(guān)注。B7-H1是Dong等從人類基因庫搜索B7同源分子時在胎盤cDNA文庫中確認(rèn)的，它編碼一個290個氨基酸的Ⅰ型跨膜蛋白，屬于免疫球蛋白超家族成員，表達于靜息的T細(xì)胞，B細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上，同時也表達于絕大多數(shù)的腫瘤組織中。B7-H1可通過誘導(dǎo)T細(xì)胞的凋亡抑制機體對腫瘤的免疫

2、反應(yīng)，從而參與腫瘤的免疫逃逸過程。TLRs是新發(fā)現(xiàn)的先天性免疫的病原識別受體，其中TLR4是第一個被發(fā)現(xiàn)的哺乳動物TLR，主要配體為革蘭陰性桿菌的脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)，TLR4的活化可激活一系列的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，如絲裂原激活的蛋白激酶(Mitogen-activatedproteinkinases，MAPKs)家族，很多研究表明TLR4被活化后可使腫瘤細(xì)胞逃避人體的免疫監(jiān)視。
　　 目的：

3、　　 研究胰腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1在應(yīng)用脂多糖(LPS)刺激前后B7-H1表達的變化，并探討其可能的分子機制，為胰腺癌的治療提供理論基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 LPS刺激以及絲裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的特異性抑制劑處理Panc-1細(xì)胞前后，應(yīng)用Western-blotting檢測MAPKs信號通路中p38絲裂原活化蛋白激酶(p38)，細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)，c-Jun氨基端激酶(JNK)磷酸化水平的變化

4、，real-timePCR和Western-blotting檢測B7-H1mRNA和蛋白的表達變化。
　　 采用SPSS13.0軟件單因素方差分析(ANVOA)，實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，兩組之間的比較采用配對t檢驗。P<0.05表示差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 LPS刺激后B7-H1的表達顯著上調(diào)，p38，ERK，JNK的磷酸化水平也明顯上調(diào)，加入MAPKs特異性的抑制劑后，LPS