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1、[目的]觀察缺氧條件下胰腺癌PANC-1細(xì)胞株缺氧誘導(dǎo)因子-1αmRNA和蛋白表達(dá)的變化。[方法]建立胰腺癌PANC-1細(xì)胞體外缺氧培養(yǎng)模型,胰腺癌PANC-1細(xì)胞分4組培養(yǎng):正常培養(yǎng)對(duì)照組、低氧濃度培養(yǎng)24小時(shí)組、低氧濃度培養(yǎng)48小時(shí)組、低氧濃度培養(yǎng)72小時(shí)組。分別培養(yǎng)后收集細(xì)胞,觀察缺氧條件下不同時(shí)點(diǎn)(24、48、72h)HIF-1的表達(dá)。應(yīng)用半定量RT-PCR方法,檢測(cè)胰腺癌PANC-1細(xì)胞中HIF-1αmRNA表達(dá)水平,應(yīng)用W
2、estern-Blot方法,檢測(cè)胰腺癌PANC-1細(xì)胞中HIF-1α蛋白表達(dá)水平。[結(jié)果]缺氧處理后,與常氧對(duì)照組相比,低氧濃度培養(yǎng)組各組的HIF-1α蛋白和mRNA表達(dá)均明顯升高(P<0.01);與低氧濃度組比較,隨缺氧時(shí)間的延長(zhǎng)HIF-1α蛋白和mRNA表達(dá)水平亦相應(yīng)增高,各組比較有顯著性差異(P<0.01)。[結(jié)論]環(huán)境缺氧可誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞HIF-1的表達(dá)上調(diào),隨缺氧時(shí)間的延長(zhǎng),HIF-1α在mRNA水平和蛋白水平表達(dá)亦相應(yīng)的
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