notch-1基因在膠質(zhì)瘤中的作用及對(duì)Akt-mTOR通路的調(diào)控.pdf

1、福建醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文notch1基因在膠質(zhì)瘤中的作用及對(duì)AktmT通路的調(diào)控姓名：趙能江申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：鄭志竑20100501凋亡。阻斷Notch1后，U251細(xì)胞的cyclinD1、CDK4、Bcl2、MCL1、PARP1蛋白的表達(dá)受到抑N(PO05)，P27、caspase3、caspase一9蛋白的表達(dá)上調(diào)(PO05)，而在過表達(dá)NICD的U251細(xì)胞其結(jié)果則相反。第三部分：Notch1對(duì)膠

2、質(zhì)瘤侵襲和血管發(fā)生的影響及機(jī)制研究利用基質(zhì)膠包被的Transwell小室檢測(cè)U251細(xì)胞侵襲能力，內(nèi)皮細(xì)胞小管形成實(shí)驗(yàn)觀察瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清對(duì)血管形成的影響，同時(shí)用Western—blot法檢測(cè)瘤細(xì)胞侵襲相關(guān)蛋白MMP2、MMP一3、MMP7的表達(dá)，RTPCR和ELASA法檢測(cè)VEGF的表達(dá)，結(jié)果顯示：阻斷Notch1可抑制U251細(xì)胞的侵襲能力和MMP。2、MMP3的表達(dá)，過表達(dá)NICD促進(jìn)腫瘤侵襲能力和侵襲相關(guān)蛋白MMP2、MMP7的表

3、達(dá)；雖然血管發(fā)生和VEGF的表達(dá)未受影響，但是阻斷Notch1能抑制U87細(xì)胞VEGFR2的表達(dá)。第四部分：Notch1對(duì)AktmToR通路調(diào)控的研究采用Westernblot法檢測(cè)Notch1干擾和NICD過表達(dá)的U251細(xì)胞中Akt—mTOR通路的主要蛋白TAkt、pAkt、pmTOR、p70S6K、p4EBPl的表達(dá)情況，結(jié)果顯示：阻斷Notchl能抑UpAkt、pmTOR、p70S6K的表達(dá)，過表達(dá)NICD的結(jié)果則相反。結(jié)論阻斷

4、Notch1能抑制膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡和周期阻滯，降低膠質(zhì)瘤的侵襲能力；促增殖的cyclinD1、CDK4蛋白和抗凋亡的Bcl2、MCL1、PARP1蛋白表達(dá)受到抑制，而抑制增殖的P27蛋白和促凋亡的caspase3、caspase9蛋白表達(dá)上調(diào)；并能抑制AktmTOR通路的pAkt、pmTOR、p70S6K蛋白的表達(dá)。因此，Notch1可能通過調(diào)控AktmTOR信號(hào)及其下游靶點(diǎn)來影響膠質(zhì)瘤的存活、增殖和侵襲能力。【關(guān)鍵詞】膠質(zhì)瘤N