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1、摘要目的:探討不同濃度的二十二碳六烯酸對(duì)人肝癌HepG2及SMCC一1171細(xì)胞的作用及其機(jī)制,為其應(yīng)用于肝癌的藥物預(yù)防和治療提供實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。方法:體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞HepG2及SMCC一1171,以DHA濃度Oug/mL為陰性對(duì)照,設(shè)置濃度為15、30、45、60、75ug/mL的實(shí)驗(yàn)組。采用CCK一8和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度DHA對(duì)HepG2及SMCC1171細(xì)胞生長(zhǎng)的相對(duì)抑制率及凋亡情況,并運(yùn)用熒光定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法分別
2、從基因和蛋白質(zhì)水平分析不同濃度DHA作用前后肝癌細(xì)胞Bcatenin及cmyc表達(dá)量的變化。結(jié)果:CCK8實(shí)驗(yàn)表明DHA在體外能抑制HepG2及SMCC一1171細(xì)胞生長(zhǎng),在DHA作用濃度為O45ug/mL,作用時(shí)間24h時(shí),實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞吸光度A值差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001),實(shí)驗(yàn)組內(nèi)兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO01)。繼續(xù)增加藥物濃度或作用時(shí)間,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)DHA可促進(jìn)HepG2及SMCC一1171細(xì)
3、胞凋亡,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞凋亡率差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001),實(shí)驗(yàn)組內(nèi)兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO01)。熒光定量PCR顯示DHA可下調(diào)HepG2及SMCC—l171細(xì)胞中cmyc基因表達(dá)水平,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組c—myc基因相對(duì)表達(dá)量的差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001),實(shí)驗(yàn)組內(nèi)兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO01);實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組及各實(shí)驗(yàn)者組之間B—catenin基因的相對(duì)表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。蛋白質(zhì)印跡法顯示DHA可降低Hep
4、G2及SMCC—l171細(xì)胞Bcatenin、c—myc蛋白質(zhì)的表達(dá)量(P005)。結(jié)論:DHA對(duì)人肝癌HepG2及SMCC一1171細(xì)胞有明顯的生長(zhǎng)增殖抑制及促進(jìn)凋亡的作用,與其降低B—catenin蛋白質(zhì)水平進(jìn)而下調(diào)Cmyc基因表達(dá)水平有關(guān)。碩士研究生:李衍彥(肝膽外科)指導(dǎo)老師:曹景玉主任醫(yī)師關(guān)鍵詞:二十二碳六烯酸;肝癌;wnt/Bcatenin信號(hào)通路andthecontrolgroupandtheexperimentalgro
5、upWesternblotdemonstratedthatDHAcoulddecreasetheproteinsexpressionofI]cateninandcmycinHepG2andSMCC1171cells(PO05)Conclusion:DHACanpromotapoptosisandinhibitproliferationonHepG2andSMCC1171cells,Thepossiblemechanismisrelate
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