硝苯地平對(duì)人孕烷X受體介導(dǎo)的CYP2B6和CYP2C9的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立由hPXR介導(dǎo)的CYP2B6和CYP2C9的藥物誘導(dǎo)劑的體外篩選體系，并分析硝苯地平誘導(dǎo)的CYP2B6和CYP2C9的分子機(jī)制;
　　方法:利用雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)，將包含hPXR蛋白識(shí)別和結(jié)合調(diào)控元件的CYP2B6和CYP2C9的啟動(dòng)子序列插入到報(bào)告基因上游，將表達(dá)載體和報(bào)告載體共轉(zhuǎn)染入HepG2細(xì)胞，并以10μM利福平作為陽性對(duì)照，分別用1μM、5μM或10μM硝苯地平處理48h后裂解細(xì)胞行雙熒光素酶的活性檢測;或

2、用10μM硝苯地平分別處理細(xì)胞12h、24h、48h后行雙熒光素酶的活性檢測;
　　結(jié)果:硝苯地平激活hPXR的起始濃度介于1～5μm之間，在5μm濃度下，硝苯地平誘導(dǎo)CYP2B6和CYP2C9表達(dá)增加3.93倍和3.59倍，與DMSO溶媒組存在顯著差異(P＜0.001)，在10μ m硝苯地平作用下，CYP2B6和CYP2C9表達(dá)分別增加6.23倍和5.24倍，與溶媒對(duì)照組和5μ m濃度組都存在顯著性差異(P＜0.001)。10μ

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