A類清道夫受體與葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78相互作用的研究.pdf_第1頁
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1、A類清道夫受體(Class A scavenger receptor,SR-A)是一種主要位于巨噬細胞表面的三聚體跨膜糖蛋白,能夠識別多種配體。SR-A介導的對化學修飾的低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的內(nèi)吞可以導致巨噬細胞內(nèi)脂質(zhì)的聚集,并引起動脈粥樣硬化。SR-A的胞漿結構域調(diào)節(jié)受體介導的脂質(zhì)內(nèi)吞、細胞黏附以及受體在細胞表面的表達等過程。 我們先期的研究表明,利用GST pull-down

2、的方法可以找到一種與SR-A胞漿域特異性結合的的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(Glucose regulated protein 78,GRP78)。在本研究中,利用免疫共沉淀的方法驗證了在細胞裂解液中GRP78和SR-A的特異性結合。利用RNA干擾技術抑制GRP78表達水平,結果發(fā)現(xiàn)細胞SR-A表達水平?jīng)]有受到影響,GRP78與SR-A的結合能力沒有明顯的改變,但是SR-A對乙?;疞DL(acLDL)的攝取能力降低。建立SR-A受體穩(wěn)定表達的H

3、EK293-SR-A細胞株,結果發(fā)現(xiàn)在有acLDL存在時,GRP78和SR-A在細胞內(nèi)的結合減少,同時細胞對acLDL的內(nèi)吞速率增加。利用免疫共沉淀結合二維電泳、質(zhì)譜分析的方法進一步研究GRP78和SR-A的反應調(diào)節(jié)機制,發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)有多個可能與GRP78和SR-A共同作用的蛋白質(zhì),提示它們可能在SR-A-GRP78反應通路中起一定作用。增加GRP78的表達水平可以使SR-A介導的腫瘤壞死因子(TNF-α)分泌增加,這種調(diào)節(jié)作用可能與MA

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