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1、目的: 1.觀察鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ (Calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMK Ⅱ)抑制劑KN-93對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠熱痛覺(jué)過(guò)敏的影響,研究KN-93在脊髓水平是否具有抗神經(jīng)病理性疼痛的作用。 2、觀察鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)抑制劑KN-93對(duì)脊髓背角pCREB表達(dá)的影響,探討KN-93對(duì)慢性神經(jīng)病理性疼痛的作用機(jī)制。 方法
2、:采用健康雄性Wistar大鼠32只(體重:180-220g),隨機(jī)分為4組(n=8),A組:假手術(shù)組+DMSO切皮前一小時(shí)鞘內(nèi)注射5%二甲基亞砜(DMSO)10μl: B組:假手術(shù)組+KN-93切皮前一小時(shí)鞘內(nèi)注射KN-93 10μl(50 μg溶于5%二甲基亞砜10μl中); C組: CCI組+DMSO切皮前一小時(shí)鞘內(nèi)注射5%DMSO l0μl; D組:CCI組+KN-93切皮前一小時(shí)鞘內(nèi)注射KN-9310μl(50 μg溶于5%二
3、甲基亞砜l0μl中)。實(shí)驗(yàn)分兩部分進(jìn)行,第一部分各組分別在術(shù)前和術(shù)后3天用熱痛刺激儀測(cè)定各組大鼠術(shù)側(cè)熱痛敏實(shí)驗(yàn)潛伏期(PWL)及基礎(chǔ)值:第二部分術(shù)后4天和7天各組隨機(jī)處死4只大鼠,取大鼠L4-5脊髓段進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,對(duì)脊髓背角pCREB染色陽(yáng)性神經(jīng)元進(jìn)行記數(shù)分析。 結(jié)果:第一部分,各組術(shù)后3天熱痛敏閾值(PWL)與術(shù)前基礎(chǔ)值比較均有不同程度減少,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);術(shù)后3天C組與其他三組比較PWL值明顯減少
4、,其差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), A、B、D三組組間比較PWL值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。第二部分,術(shù)后4天與7天四組免疫組化分析結(jié)果比較:C組脊髓背角pCREB表達(dá)最強(qiáng),與其他三組比較明顯增強(qiáng)(P<0.05),A、B、D三組組間比較pCREB表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論:1、鞘內(nèi)預(yù)注射KN-93能明顯減輕慢性坐骨神經(jīng)松結(jié)扎大鼠熱痛敏,提示鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制劑KN-93在脊髓水平具有抗神經(jīng)病
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