鞘內(nèi)注射氫氣鹽溶液對神經(jīng)病理性疼痛的影響.pdf

1、神經(jīng)病理性疼痛綜合癥由神經(jīng)系統(tǒng)損傷或疾病引起，它的顯著特點(diǎn)是機(jī)械性異常性疼痛和熱痛覺過敏。引起神經(jīng)病理性疼痛的疾病在臨床上很常見，這些疾病包括：(1)外周神經(jīng)局部病變：外周神經(jīng)卡壓綜合癥，幻肢痛，創(chuàng)傷后神經(jīng)痛，糖尿病單神經(jīng)病變，缺血型神經(jīng)病，結(jié)節(jié)性多動脈炎。(2)累及外周神經(jīng)系統(tǒng)的全身性疾?。禾悄虿?，酒精中毒，淀粉樣病變，漿細(xì)胞瘤，HIV感染，甲狀腺功能減退，遺傳性感覺神經(jīng)病，法布里病，班瓦爾特綜合征，維生素B缺乏，中毒性神經(jīng)病(砷，鉈

2、，金，氯霉素，甲硝唑，呋喃，異煙肼，長春花生物堿，紫杉樹提取的抗癌藥物)。(3)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病變：脊髓損傷，腦梗死(尤其是丘腦和腦干的梗死)，脊髓梗死，脊髓腫瘤，多發(fā)性硬化。神經(jīng)病理性疼痛的治療對臨床醫(yī)生是一個挑戰(zhàn)，因?yàn)樗臋C(jī)制還不清楚，也沒有特別有效的藥物，即使用阿片類藥物治療，效果也不好，而且長期使用有副作用。近年來，有研究表明，活性氧(ROS)參與了神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生，有ROS清除劑可以緩解神經(jīng)病理性疼痛。氫氣是新發(fā)現(xiàn)的一種R

3、OS清除劑，它的生理鹽水溶液(氫氣鹽溶液)也有清除ROS的作用，而且具有使用方便的優(yōu)點(diǎn)。氫氣鹽溶液是否有緩解神經(jīng)病理性疼痛的作用，它的應(yīng)用前景如何，目前國內(nèi)外尚未見關(guān)于此方面的研究報道。
　　 為了驗(yàn)證這種假設(shè)，本研究通過結(jié)扎SD大鼠腰5神經(jīng)建立神經(jīng)病理性的大鼠模型(SNL模型)，采用鞘內(nèi)注射的給藥方式，實(shí)驗(yàn)分三部分，分別為單次注射氫氣鹽溶液對神經(jīng)病理性疼痛的影響、重復(fù)注射氫氣鹽溶液對神經(jīng)病理性疼痛的影響和氫氣鹽溶液預(yù)處理對神經(jīng)

4、病理性疼痛的影響，測定50％抬足閾值和熱縮足時間作為疼痛行為學(xué)指標(biāo)，以生理鹽水注射組大鼠作為對照組，觀察比較鞘內(nèi)注射氫氣鹽溶液對神經(jīng)病理性疼痛的影響。在明確了鞘內(nèi)注射氫氣鹽溶液對神經(jīng)病理性疼痛影響的基礎(chǔ)上，我們繼續(xù)對可能機(jī)制進(jìn)行了初步研究：①大鼠腰5神經(jīng)結(jié)扎12天后，經(jīng)主動脈灌流4％多聚甲醛固定大鼠，取腰膨大節(jié)段脊髓，利用免疫熒光的方法檢測脊髓背角細(xì)胞ROS含量(測定8-OH-G水平)和背角膠質(zhì)細(xì)胞活化的情況(測定GFAP和Iba-1水

5、平)，并分析ROS水平和膠質(zhì)細(xì)胞活化之間的關(guān)系；②應(yīng)用ELISA法檢測大鼠腰膨大節(jié)段脊髓兩側(cè)炎性介質(zhì)(TNF-α和IL-1β)表達(dá)水平的變化；③利用免疫熒光的方法檢測脊髓背角細(xì)胞ROS含量(測定8-OH-G水平)和背角神經(jīng)元凋亡的情況，并分析ROS水平和神經(jīng)元凋亡之間的關(guān)系。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1.動物實(shí)驗(yàn)研究：①與對照組大鼠相比，鞘內(nèi)單次注射氫氣鹽溶液顯著緩解神經(jīng)病理性疼痛大鼠機(jī)械性異常性疼痛和熱痛覺過敏

6、(P＜0.01)，單次注射后2小時作用達(dá)到高峰，并維持8小時左右后作用消失。②與對照組大鼠相比，鞘內(nèi)反復(fù)注射氫氣鹽溶液顯著緩解神經(jīng)病理性疼痛大鼠機(jī)械性異常性疼痛和熱痛覺過敏(P＜0.01)，觀察沒有藥物耐受現(xiàn)象。③氫氣鹽溶液預(yù)處理有類似作用。因此，動物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證實(shí)：氫氣鹽溶液能夠緩解神經(jīng)病理性疼痛。
　　 2.分子機(jī)制研究：①與假手術(shù)組相比，對照組大鼠患側(cè)脊髓后角細(xì)胞8-OH-G水平明顯升高(P＜0.01)，活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞

7、和小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量都明顯升高(P＜0.01)；與對照組大鼠相比，鞘內(nèi)注射氫氣鹽溶液大鼠患側(cè)脊髓后角細(xì)胞8-0H-G水平明顯降低(P＜0.01)，活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量都明顯降低(P＜0.01)；而各組動物對側(cè)脊髓后角8-OH-G含量無明顯差異，活化的膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量也無明顯差異；②ELISA檢測顯示，與假手術(shù)組相比，對照組大鼠患側(cè)脊髓后角細(xì)胞炎性介質(zhì)水平明顯升高(P＜0.01)，鞘內(nèi)注射氫氣鹽溶液可以逆轉(zhuǎn)這種變化(P＜0.01)；

8、對側(cè)脊髓后角炎性介質(zhì)水平?jīng)]有明顯差異；③與假手術(shù)組相比，對照組大鼠患側(cè)脊髓后角細(xì)胞8-OH-G水平明顯升高(P＜0.01)，處于凋亡狀態(tài)的神經(jīng)元數(shù)量都明顯升高(P＜0.01)；與對照組大鼠相比，鞘內(nèi)注射氫氣鹽溶液大鼠患側(cè)脊髓后角細(xì)胞8-0H-G水平明顯降低(P＜0.01)，凋亡神經(jīng)元的數(shù)量都明顯降低(P＜0.01)；
　　 本研究顯示，氫氣鹽溶液與其它ROS清除劑如苯基氮叔丁基硝酮(PBN)、維生素E一樣，能顯著緩解神經(jīng)病理性疼