高糖高棕櫚酸培養(yǎng)對(duì)β細(xì)胞脂質(zhì)含量及FAT-CD36基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的: 研究高糖高棕櫚酸培養(yǎng)對(duì)β細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量以及脂肪酸轉(zhuǎn)位酶（FAT/CD36）基因表達(dá)的影響,探討FAT/CD36在β細(xì)胞脂質(zhì)沉積和胰島素分泌缺陷中的作用。
　　 方法:
　　 1.NIT-1細(xì)胞分別給予5 mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、20 mmol/L、25 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖以及0 mmol/L、0.125 mmol/L、0.25 mmol/L、0.5 mmol/L棕

2、櫚酸培養(yǎng)24小時(shí)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞FAT/CD36的基因表達(dá)。根據(jù)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果選取進(jìn)一步分組實(shí)驗(yàn)的最適葡萄糖濃度（25 mmol/L）和棕櫚酸濃度（0.25 mmol/L）。
　　 2.體外培養(yǎng)NIT-1細(xì)胞，分別以5 mmol/L葡萄糖（對(duì)照組，NC）、25 mmol/L葡萄糖（高糖組，HG）、0.25 mmol/L棕櫚酸＋5 mmol/L葡萄糖（高棕櫚酸組，HP）以及0.25 mmol/

3、L棕櫚酸＋25 mmol/L葡萄糖（高糖高棕櫚酸組，GP）培養(yǎng)24小時(shí)后，運(yùn)用酶比色法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)甘油三酯（TG）含量；放射免疫分析法測(cè)定胰島素分泌；并以β-actin為內(nèi)參照，RT-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞 FAT/CD36 mRNA的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 1.不同濃度葡萄糖培養(yǎng)細(xì)胞24小時(shí)后，細(xì)胞FAT/CD36 mRNA水平呈濃度依賴(lài)性增高，當(dāng)葡萄糖濃度增加至25 mmol/L時(shí)FAT/CD36 mRNA的表達(dá)水

4、平達(dá)到最高峰。但是，不同濃度棕櫚酸干預(yù)后，各組FAT/CD36 mRNA表達(dá)水平并無(wú)明顯差異。
　　 2.高糖、高棕櫚酸以及高糖加高棕櫚酸分別孵育細(xì)胞24小時(shí)后，與NC組比較，各處理組細(xì)胞內(nèi)TG含量增加，而葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS)下降，其中以GP組變化最顯著（P<0.01），且GP組與HG組（P<0.05）和HP組（P<0.01）之間的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.在高糖的孵育下，HG組和GP組FAT/CD3

5、6 mRNA表達(dá)顯著高于NC組（P<0.01），但無(wú)論是5 mmol/L還是25 mmol/L葡萄糖添加棕櫚酸后的各組與相應(yīng)的單純葡萄糖組比較，F(xiàn)AT/CD36 mRNA表達(dá)均無(wú)明顯改變。
　　 結(jié)論:
　　 1.葡萄糖可促進(jìn)β細(xì)胞FAT/CD36 mRNA的表達(dá)，后者的表達(dá)水平與葡萄糖的濃度有關(guān)，呈劑量依賴(lài)性。但棕櫚酸對(duì)FAT/CD36基因的表達(dá)卻無(wú)明顯影響。
　　 2.在高棕櫚酸的環(huán)境下，高糖可進(jìn)一步促進(jìn)β細(xì)