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文檔簡介
1、目的:
本實驗Western blot檢測PRXⅢ蛋白在人卵巢癌敏感細胞系及卵巢癌紫杉醇耐藥細胞系的表達情況。應用流式細胞分析儀和Western blot測定紫杉醇作用下兩種卵巢癌細胞凋亡及PRXⅢ蛋白表達情況,從而探討PRXⅢ與卵巢癌紫杉醇耐藥的關系。
方法:
一、細胞培養(yǎng)
SKOV-3,SKOV-3/TAX,置于含有10%胎牛血清的DEME培養(yǎng)液內(nèi),在37℃、5%CO2、飽和濕
2、度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。每3天更換培養(yǎng)液,細胞長滿時以O.25%胰酶消化傳代。
二、Western blot
檢測PRXⅢ蛋白在人卵巢癌敏感細胞系及卵巢癌紫杉醇類耐藥細胞系的表達情況,及紫杉醇作用下卵巢癌細胞中PRXⅢ蛋白的表達情況。
三、流式細胞分析儀
檢測紫杉醇作用下SKOV3、SKOV-3/TAX兩種細胞凋亡情況,及其之間的差異。
結(jié)果
一、PRXⅢ蛋白在
3、卵巢癌敏感細胞系及紫杉醇耐藥細胞系的表達情況
卵巢癌紫杉醇耐藥細胞PRXⅢ蛋白表達量顯著高于卵巢癌敏感細胞系(其蛋白表達均值分別為200±4.24;155±2.83,P<0.05)。
二、紫杉醇作用下卵巢癌紫杉醇耐藥細胞與卵巢癌敏感細胞凋亡情況
紫杉醇作用下卵巢癌紫杉醇耐藥細胞的凋亡率明顯低于卵巢癌敏感細胞系有統(tǒng)計學意義。[凋亡率(2.63±0.21)%;(7.34±0.24)%,P<0.05]
4、
三、紫杉醇作用后兩種卵巢癌細胞系PRXⅢ蛋白表達情況
紫杉醇作用下PRXⅢ卵巢癌耐藥細胞系的表達要高于卵巢癌敏感細胞系,有統(tǒng)計學意義(其蛋白表達的平均值分別是203±2.83:137.5±2.12,P<0.05)。
結(jié)論:
PRXⅢ蛋白在卵巢癌紫杉醇耐藥細胞系中表達量明顯高于敏感組,在紫杉醇作用下卵巢癌紫杉醇耐藥細胞凋亡率明顯低于敏感細胞且PRXⅢ表達量明顯高于敏感組,提示PRX
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