

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、卵巢癌是發(fā)病率第二位的女性生殖器惡性腫瘤,但死亡率居婦科惡性腫瘤之首。卵巢癌的高發(fā)年齡段在40~70歲之間。發(fā)病率占婦科惡性腫瘤的22.9%,僅次于宮頸癌,并以每年1%的速度遞增。由于缺乏特異的臨床癥狀和相應(yīng)的早期診斷手段,患者僅在出現(xiàn)腹部疼痛,消化道癥狀時才就診,初診時2/3已屬晚期。手術(shù)常難徹底根除腫瘤,故以紫杉醇聯(lián)合鉑類化療在卵巢癌綜合治療中占有重要地位,但是腫瘤細(xì)胞的原發(fā)性或繼發(fā)性耐藥是影響化療效果,造成腫瘤復(fù)發(fā)的主要原因。使患
2、者術(shù)后的五年生存率僅為20%~30%。若想提高卵巢癌患者的治愈率,明確耐藥相關(guān)分子機(jī)制,尋找有效的耐藥逆轉(zhuǎn)劑和治療靶標(biāo)是當(dāng)務(wù)之急,這對提高卵巢癌化療敏感性,逆轉(zhuǎn)耐藥,調(diào)整治療方案具有重要的意義。近年來發(fā)現(xiàn)一類依賴細(xì)胞因子的負(fù)性調(diào)控蛋白,細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子SOCS家族。該家族主要通過對JAK/STAT信號通路的負(fù)反饋調(diào)節(jié)發(fā)揮生物學(xué)功能。JAK/STAT途徑參與多種細(xì)胞因子,生長因子和激素的轉(zhuǎn)導(dǎo)達(dá)到調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長,增殖,分化和凋亡的目
3、的。近年來發(fā)現(xiàn)JAK/STAT信號通路參與多種腫瘤的發(fā)生,發(fā)展。SOCS家族則是通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)該通路而抑制細(xì)胞異常增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。該實驗通檢測卵巢癌順鉑敏感株A2780細(xì)胞、順鉑耐藥株CP70細(xì)胞中SOCS2的表達(dá),探討SOCS2與卵巢癌鉑類耐藥的關(guān)系。應(yīng)用甲基化酶抑制后兩種卵巢癌細(xì)胞中SOCS2的變化及對化療藥物的敏感性。探討SOCS2在卵巢癌細(xì)胞耐藥中可能起到的作用,觀測SOCS2蛋白表達(dá)升高后CP70細(xì)胞對順鉑化療敏感性的改變
4、。為逆轉(zhuǎn)卵巢癌鉑類耐藥提供具有臨床應(yīng)用價值的依據(jù)。
研究目的:
1.探討SOCS2基因表達(dá)與卵巢癌鉑類耐藥的相關(guān)性及其在卵巢癌鉑類耐藥中的可能機(jī)制。
2.探討A2780和CP70細(xì)胞SOCS2基因的甲基化狀態(tài)。探究應(yīng)用甲基化酶抑制劑后SOCS2的表達(dá)變化及其對順鉑耐藥性影響。
3.pEGFP-N1-SOCS2瞬時轉(zhuǎn)染增加SOCS2蛋白表達(dá)后卵巢癌細(xì)胞對順鉑耐藥性的改變及其可能作用機(jī)制。
5、研究內(nèi)容和方法:
1.RT-PCR、western bloting、免疫細(xì)胞化學(xué)檢測卵巢癌順鉑敏感株A2780細(xì)胞、順鉑耐藥株CP70細(xì)胞中SOCS2的mRNA和蛋白表達(dá)及定位;western bloting、免疫細(xì)胞化學(xué)檢測順鉑處理后A2780和CP70細(xì)胞中SOCS2蛋白表達(dá)及定位的變化,分析SOCS2表達(dá)與卵巢癌鉑類耐藥的相關(guān)性。
2.甲基化實時定量PCR檢測A2780和CP70細(xì)胞SOCS2基因的甲基化狀態(tài)。
6、RT-PCR, western bloting、免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測甲基化酶抑制劑5-Aza-CdR處理A2780與CP70細(xì)胞后SOCS2的mRNA和蛋白表達(dá)。MTT法檢測藥物處理后兩種細(xì)胞對順鉑敏感性的改變。
3.MTT法檢測pEGFP-N1-SOCS2瞬時轉(zhuǎn)染CP70細(xì)胞增加SOCS2蛋白表達(dá)后CP70細(xì)胞對順鉑敏感性的改變;TUNEL法檢測增加SOCS2蛋白表達(dá)后,順鉑誘導(dǎo)CP70細(xì)胞凋亡改變的狀況。
研究結(jié)果
7、:
1.A2780細(xì)胞的SOCS2基因和蛋白表達(dá)水平較CP70細(xì)胞高,在A2780細(xì)胞與CP70細(xì)胞中均呈漿表達(dá)。順鉑處理A2780和CP70細(xì)胞后,兩種細(xì)胞中SOCS2蛋白表達(dá)均呈時間和劑量依賴性降低。
2.A2780和CP70細(xì)胞SOCS2基因都有不同程度的甲基化改變。應(yīng)用不同劑量的甲基化酶抑制劑處理兩種細(xì)胞后,A2780與CP70細(xì)胞中SOCS2的蛋白表達(dá)呈現(xiàn)劑量依賴性增高,并呈現(xiàn)核漿共表達(dá)狀態(tài)。對順鉑的敏感性
8、均增強(qiáng)。
3.感染pEGFP-N1-SOCS2后,CP70細(xì)胞對順鉑的敏感性有待進(jìn)一步探討。
結(jié)論:
1.SOCS2在順鉑敏感細(xì)胞和耐藥細(xì)胞中表達(dá)強(qiáng)度不同,順鉑誘導(dǎo)后兩種卵巢癌細(xì)胞SOCS2蛋白表達(dá)呈時間和劑量依賴性減弱,提示SOCS2在卵巢癌順鉑耐藥機(jī)制形成中發(fā)揮重要作用。
2.A2780和CP70細(xì)胞SOCS2的低表達(dá)可能與其啟動子CpG島的甲基化狀態(tài)有關(guān),去甲基化后,SOCS2蛋白表達(dá)明顯升
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- APE1表達(dá)與卵巢癌鉑類耐藥相關(guān)性的初步研究.pdf
- eIF3a與卵巢癌鉑類耐藥相關(guān)性的研究.pdf
- S100A4與卵巢癌鉑類耐藥的相關(guān)性研究.pdf
- 卵巢癌腹水與卵巢癌耐藥的相關(guān)性研究.pdf
- PRXⅢ與卵巢癌鉑類耐藥的研究.pdf
- 卵巢癌TGFBI啟動子甲基化與卵巢癌耐藥的相關(guān)性研究.pdf
- PRXⅢ與卵巢癌紫杉醇耐藥相關(guān)性的研究.pdf
- BRCA2關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域突變與卵巢癌新輔助化療獲得性鉑類耐藥的相關(guān)性研究.pdf
- 核苷酸切除修復(fù)基因多態(tài)性與卵巢癌鉑類藥物耐藥相關(guān)性研究.pdf
- 與人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞相關(guān)microRNA的篩選研究.pdf
- PI3K-Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與卵巢癌順鉑耐藥的相關(guān)性研究.pdf
- 卵巢癌鉑類耐藥細(xì)胞系線粒體基因組和蛋白質(zhì)組分析及其與臨床耐藥相關(guān)性的研究.pdf
- Prohibitin蛋白與卵巢癌紫杉醇耐藥相關(guān)性的初步研究.pdf
- 催乳素與卵巢癌相關(guān)性的臨床研究.pdf
- 卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究.pdf
- EZH2基因與上皮性卵巢癌相關(guān)性的研究.pdf
- HLA-G與卵巢癌的相關(guān)性研究.pdf
- Peroxiredoxin Ⅲ的表達(dá)與卵巢癌相關(guān)耐藥及預(yù)后的關(guān)系.pdf
- 卵巢癌順鉑耐藥株的建立及耐藥機(jī)制的研究.pdf
- HuR與COX-2在上皮性卵巢癌表達(dá)與預(yù)后因素的相關(guān)性研究.pdf
評論
0/150
提交評論