發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位軟骨組織病理改變與細(xì)胞凋亡的動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：動(dòng)態(tài)觀察發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位（DDH）在髖關(guān)節(jié)脫位以及閉合復(fù)位髖關(guān)節(jié)后，髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡與發(fā)育異常之間的關(guān)系，以及與髖關(guān)節(jié)脫位持續(xù)時(shí)間和干預(yù)措施的關(guān)聯(lián)性。
　　方法：新西蘭大耳白兔100只，雌雄不限，月齡4W，體重（0.5±0.05）kg，平均0.5 kg，采用兔后肢伸膝屈髖位管型石膏固定方法制作DDH模型。將實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物左后肢管型石膏固定為實(shí)驗(yàn)組，右后肢不做處理為空白對(duì)照組。石膏固定術(shù)前、術(shù)后8W分別攝X線片，根據(jù)髖

2、臼指數(shù)，Shenton線等方法判定是否脫位成功。將固定8W后經(jīng)X線證實(shí)存在DDH的大耳白兔隨機(jī)分為5組，A組立即處死；B組和C組繼續(xù)固定，分別在2W和4W后處死；D組和E組解除固定并實(shí)施閉合復(fù)位髖關(guān)節(jié)（X線片證實(shí)復(fù)位成功）后2W和4W處死，均獲取實(shí)驗(yàn)側(cè)及對(duì)照側(cè)髖關(guān)節(jié)標(biāo)本。4℃條件下解剖髖關(guān)節(jié)，以4﹪多聚甲醛固定雙側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨標(biāo)本48h，10%的乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na2）脫鈣10W，經(jīng)過脫水、石蠟包埋、連續(xù)切片，制作成

3、5μm的標(biāo)本待檢。動(dòng)態(tài)觀察雙側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨的病理變化，HE染色觀察細(xì)胞病理學(xué)變化、電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡率、免疫組化 S-P法檢測細(xì)胞內(nèi) Bcl-2、Caspase-3和Caspase-8的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：DDH髖關(guān)節(jié)脫位的實(shí)驗(yàn)側(cè)X線顯示髖臼指數(shù)較對(duì)照側(cè)明顯增大（P＜0.05）。持續(xù)髖關(guān)節(jié)脫位組實(shí)驗(yàn)側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞稀疏，排列混亂，細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照側(cè)（P＜0.05），細(xì)胞凋亡與Bcl

4、-2低表達(dá)以及Caspase-3和Caspase-8高表達(dá)呈正相關(guān)。透視電鏡下細(xì)胞染色質(zhì)邊集，核形不規(guī)整，核膜表面凹凸不平。閉合復(fù)位髖關(guān)節(jié)組實(shí)驗(yàn)側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨依然排列混亂，大小不均，與對(duì)照側(cè)相比可見軟骨細(xì)胞輕微腫脹。透視電鏡顯示對(duì)照側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰可見，胞質(zhì)均勻，胞核呈圓形，核仁居中；實(shí)驗(yàn)側(cè)細(xì)胞核染色質(zhì)發(fā)生固縮，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象的空泡結(jié)構(gòu)，細(xì)胞器不易辯認(rèn)。實(shí)驗(yàn)側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

5、凋亡率高于對(duì)照側(cè)（P＜0.05），細(xì)胞凋亡與 Bcl-2低表達(dá)以及 Caspase-3和Caspase-8高表達(dá)呈正相關(guān)。持續(xù)髖關(guān)節(jié)脫位組與閉合復(fù)位髖關(guān)節(jié)組的實(shí)驗(yàn)側(cè)髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，Caspase-8表達(dá)組間比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，但是，Bcl-2和Caspase-3表達(dá)情況組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：本研究表明，DDH髖關(guān)節(jié)脫位后的髖臼和股骨頭關(guān)節(jié)軟骨中