糖尿病大鼠血糖控制前后腎小管上皮細(xì)胞E2A和Id2蛋白表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的：動(dòng)態(tài)觀察分化抑制因子Id2、E2A及E-cadherin蛋白在糖尿病大鼠血糖控制前后腎小管上皮細(xì)胞的表達(dá)變化，探討三者在腎小管間質(zhì)纖維化和腎小管上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化過(guò)程(EMT)中可能發(fā)揮的作用及相互關(guān)系。
　　方法：雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（N）、糖尿病組（DM），糖尿病胰島素治療組(DMT)。采用鏈脲佐菌素（55mg/kg）尾靜脈注射復(fù)制Ⅰ型糖尿病大鼠模型，N組和DM組成模后分別于2周（2w）、8周（8w）、

2、16周（16w）、24周（24w）處死；成模13周起，DMT組大鼠采用胰島素個(gè)體化治療，以血糖控制在4-7mmol/L，尿糖陰性為準(zhǔn)，分別于16周和24周時(shí)處死各組大鼠。生化方法測(cè)血糖、24h尿蛋白，并計(jì)算腎臟指數(shù)。HE染色光鏡下觀察胰腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，HE、PAS、Masson染色光鏡下觀察腎組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。免疫組化觀察大鼠腎臟FN蛋白的表達(dá)情況；Western blotting檢測(cè)大鼠腎組織Id2、E2A、E-cadheri

3、n、α-SMA蛋白的變化；RT-PCR檢測(cè)腎組織Id2 mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）與N組相比，不同時(shí)間點(diǎn)DM組大鼠血糖、24h尿蛋白量、腎臟指數(shù)均顯著升高(P<0.01)，并出現(xiàn)腎組織形態(tài)學(xué)異常改變；而DMT組大鼠血糖、24h尿蛋白量、腎臟指數(shù)均低于DM組(P<0.05)，腎纖維化病變改善。（2）與N組大鼠比較，DM大鼠腎組織Id2蛋白和mRNA的表達(dá)從2w開(kāi)始減少，DM16w、24w顯著減少(P<0.05),并伴有E-

4、cadherin的表達(dá)減少（P<0.05）、α-SMA表達(dá)增加（P<0.05）和FN蛋白的沉積增多（P<0.05）。（3）與DM組相比，DMT組大鼠腎組織Id2蛋白和mRNA表達(dá)均明顯增加（P<0.05)，腎組織E2A蛋白表達(dá)顯著減少（P<0.05），且E-cadherin的表達(dá)增加（P<0.05）、α-SMA表達(dá)減少（P<0.05)和FN在間質(zhì)的沉積減少（P<0.05）。
　　結(jié)論：（1）大鼠在持續(xù)糖尿病狀態(tài)中，Id2蛋白在腎小