Hsp90抑制劑對(duì)福美雙誘導(dǎo)的脛骨軟骨發(fā)育不良肉雞生長板血管生成的影響.pdf

1、肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良(TD)是發(fā)生在快速生長的禽類中的一種重要的腿部疾病，主要發(fā)生在脛骨生長板近骺端。主要特征是軟骨無血管化、生長板膨大、脛骨變性以及跛行。
　　1.Hsp90抑制劑雷公藤素修復(fù)由福美雙誘導(dǎo)的肉雞脛骨生長板血管生成
　　雷公藤素是一種藥用植物雷公藤根部提取物，作為著名的熱休克蛋白90(Hsp90)抑制劑被廣泛報(bào)道。近期報(bào)道，Hsp90抑制劑通過軟骨細(xì)胞分化和生長板血管生成有效的恢復(fù)了生長板的形態(tài)。本研究旨在調(diào)

2、查Hsp90抑制劑雷公藤素對(duì)肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良(TD)的影響。肉雞被分為三組:對(duì)照組、福美雙誘導(dǎo)TD發(fā)生組(40 mg/kg/d)、雷公藤素治療組。通過QRT-PCR檢測Hsp90、VEGF、Flk-1的表達(dá)水平，通過western blot檢測Hsp90所表達(dá)的蛋白質(zhì)水平。發(fā)生TD的肉雞中，Hsp90的表達(dá)水平和VEGF mRNA的轉(zhuǎn)錄水平增加，F(xiàn)lk-1受體的表達(dá)下調(diào)。
　　雷公藤素在治療TD過程中，Hsp90 mRNA轉(zhuǎn)錄

3、抑制、蛋白質(zhì)水平降低和Flk-1受體的表達(dá)增加，差異顯著(P＜0.05)?？傊?，使用雷公藤素可以預(yù)防肉雞脛骨軟骨生長板無血管化、生長跛行和恢復(fù)生長板血管生成。在肉雞中，雷公藤素可能是通過Hsp90抑制劑基因的表達(dá)來有效的治療TD的發(fā)生。
　　2.Hsp90抑制劑雷公藤素減弱福美雙對(duì)肝臟造成的損傷
　　本試驗(yàn)主要研究雷公藤素對(duì)肝臟的影響。福美雙對(duì)引發(fā)禽類跛行和誘導(dǎo)肝臟毒性中被廣泛報(bào)道。為了確定福美雙對(duì)肉雞肝臟的氧化損傷和毒性損

4、害，通過血清中氧化應(yīng)激的變化評(píng)估福美雙誘導(dǎo)對(duì)肝臟毒性損害以及雷公藤素對(duì)福美雙誘導(dǎo)肉雞TD的保護(hù)效果。肉雞隨機(jī)分為三組:對(duì)照組、福美雙誘導(dǎo)TD發(fā)生組(40 mg/kg/d)、雷公藤治療組。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，在福美雙飼喂的肉雞肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALP)活性水平顯著降低，天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平、丙二醛(MDA)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)水平升高。而雷公藤

5、素治療組超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALP)活性水平增加，天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平、丙二醛(MDA)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)水平顯著降低。
　　以上結(jié)果表明，雷公藤素能夠有效減輕福美雙對(duì)肝臟的損傷，糾正氧化失衡。雷公藤素可以被用來減輕福美雙造成的肉雞肝臟損傷。
　　3.藤黃酸抑制由福美雙誘導(dǎo)的脛骨軟骨發(fā)育不良Hsp90的表達(dá)
　　在中國幾千年的歷史中，藤黃

6、酸被用來作為抗炎藥。藤黃酸是一種呈棕黃色的中草藥提取物，存在于藤黃科植物藤黃樹的干燥樹脂中（藤黃科，藤黃屬）。在臨床實(shí)踐中，藤黃酸也被用來作為Hsp90抑制劑。本試驗(yàn)用于證明藤黃酸對(duì)由福美雙誘導(dǎo)的脛骨軟骨發(fā)育不良(TD)脛骨生長板的寬度、Hsp90的表達(dá)水平和抗氧化能力的影響。150只商品化肉雞被隨機(jī)分為三組:對(duì)照組、福美雙誘導(dǎo)TD發(fā)生組(40 mg/kg/d)、藤黃酸治療組。于第7天和14天采集脛骨樣品來檢測Hsp90的表達(dá)水平，在試

7、驗(yàn)后期采集肝臟樣品檢測肝臟的抗氧化酶。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比通過在第7、14天的觀察發(fā)現(xiàn)福美雙誘導(dǎo)TD組脛骨生長板增大、Hsp90基因的表達(dá)水平顯著增強(qiáng)(P＜0.05);福美雙誘導(dǎo)組在第14天肝臟的抗氧化能力下降。藤黃酸可以使Hsp90基因的表達(dá)水平顯著下調(diào)，肝臟的抗氧化能力顯著修復(fù)(P＜0.05)，同時(shí)減少生長板寬度、緩和跛行?？傊?，藤黃酸可以改善患TD肉雞的生長板血管生成，為治療肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良提供了一種新方法。
　　

8、4.新生霉素通過抑制Hsp90基因表達(dá)改善肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良
　　新生霉素是一種抗生素藥并被認(rèn)為是Hsp90抑制劑。本試驗(yàn)旨在通過骨骼畸形改善情況和檢測特異性蛋白表達(dá)水平評(píng)估Hsp90抑制劑新生霉素在福美雙誘導(dǎo)的肉雞TD中的治療效果。肉雞被分為三組:對(duì)照組、福美雙誘導(dǎo)TD發(fā)生組(50 mg/kg)、新生霉素治療組(10mg/kg/d)。新生霉素用于治療福美雙誘導(dǎo)的TD，直到試驗(yàn)結(jié)束。各組通過HE染色評(píng)估生長板組織形態(tài)特征，通過Q

9、RT-PCR、免疫組化(IHC)和western blot分析來評(píng)估Hsp90基因的表達(dá)水平。
　　結(jié)果表明，TD發(fā)生組生長板細(xì)胞膨大、軟骨細(xì)胞排列不規(guī)則、蛋白聚糖水平降低。TD發(fā)生組與對(duì)照組相比，Hsp90的表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.05)。新生霉素治療組生長板寬度得到修復(fù)，軟骨細(xì)胞分化、新生血管的生成、Hsp90的表達(dá)水平回到正常水平、蛋白聚糖水平增加，最終消除跛行。結(jié)果表明，軟骨的累積和Hsp90的表達(dá)水平上調(diào)與TD的發(fā)病機(jī)制有