單胺氧化酶抑制劑苯乙肼對套細胞淋巴瘤的組蛋白甲基化及Wnt信號通路的調(diào)控研究.pdf

1、目的：研究單胺氧化酶抑制劑苯乙肼在體外對套細胞淋巴瘤Jeko-1細胞組蛋白甲基化及Wnt信號通路的影響，探討其可能的作用機制。
　　方法：（1）應用MTT比色法檢測苯乙肼對Jeko-1細胞增殖抑制率的影響；流式細胞術(shù)觀察細胞凋亡的變化。（2）應用蛋白免疫印跡法（Western Blot）觀察苯乙肼作用后Jeko-1細胞的凋亡相關蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax及P21蛋白表達水平的變化，組蛋白H3K4單甲基化、雙甲基化、

2、三甲基化及組蛋白H3乙酰化狀態(tài)的變化。同時研究Wnt信號轉(zhuǎn)導通路相關蛋白表達水平的變化。
　　結(jié)果：（1）單胺氧化酶抑制劑苯乙肼抑制Jeko-1細胞增殖，苯乙肼5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L作用24 h后，Jeko-1細胞增殖抑制率分別為(10.43±1.85)％、(36.54±4.34)%、(43.52±3.37)%、(80.05±3.56)%，P<0.05；隨濃度的增加，細胞增殖抑制率不斷

3、增加。（2）苯乙肼可上調(diào)細胞凋亡相關蛋白Bax,表達凋亡及執(zhí)行蛋白procaspase-3，細胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白P21表達，下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2；苯乙肼濃度分別為0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L作用24小時后，Jeko-1細胞的凋亡率分別為(3.64±1.52)%、(17.64±3.46)%、(30.14±3.16)%、(52.45±5.31)%，隨著苯乙肼濃度的增加，凋亡率逐漸上升，表現(xiàn)

4、為濃度依賴性。（3）苯乙肼上調(diào)Jeko-1細胞組蛋白H3K4me1、H3K4me2甲基化水平及H3乙?；?，而組蛋白H3K4me3水平無明顯改變。（4）苯乙肼處理24小時后Jeko-1細胞的 WNT通路蛋白p-GSK-3β、β-catenin、c-myc、cyclinD1表達均下降。
　　結(jié)論：（1）單胺氧化酶抑制苯乙肼能明顯抑制Jeko-1細胞的增殖，可能與上調(diào)P21有關。（2）苯乙肼可誘導Jeko-1細胞凋亡，可能與下調(diào)Bc