食管黏膜鱗狀上皮癌相關(guān)microRAN的研究.pdf

1、食管癌是常見的上消化道惡性腫瘤,在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率分別為第8位和第6位。我國的食管癌發(fā)病率居世界首位,同時也是食管癌死亡率最高的國家。我國食管癌以食管鱗狀細胞癌(ESCC)為主,術(shù)后5年生存率為20％左右,死亡率居高不下的主要原因是大部分患者就診時已是晚期,因此早診早治是解決我國食管癌死亡率居高不下的重要手段。然而目前對于食管黏膜上皮癌變早期的分子標志物缺乏了解。
　　 真核細胞中廣泛存在著一類長度為19-24個核苷酸

2、的非編碼小RNA分子,即microRNA(miRNA)。這類RNA分子能夠抑制基因的表達,在細胞的多種生命活動,如增殖、分化、凋亡中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。因而,miRNA與腫瘤發(fā)生也有著密切的關(guān)系。
　　 我們利用TaqMan human microRNA arrays檢測了3對食管原位癌和3對進展期ESCC(T3N0M0)的病變及配對正常組織miRNA表達譜,發(fā)現(xiàn)了4個在病變與配對正常組織中有顯著差異表達的miRNAs:miR-

3、133a,miR-143,miR-145與miR-375。我們用實時定量PCR的方法檢測了這4個miRNAs在14對食管輕中度不典型增生,26對重度不典型增生、原位癌及29對進展期ESCC中的表達水平。發(fā)現(xiàn)miR-133a,miR-143,miR-145與miR-375在食管黏膜重度不典型增生、原位癌及進展期ESCC中,相對表達較配對正常組織顯著下調(diào),在輕中度不典型增生中未見這種改變。其中,miR-133a,miR-143與miR-14

4、5的相對表達水平在重度不典型增生、原位癌組與進展期ESCC組中無顯著差異；而miR-375在進展期ESCC組中的相對表達水平較重度不典型增生、原位癌組顯著降低。
　　 體外和體內(nèi)實驗表明miR-375高表達能夠引起ESCC細胞系的細胞周期阻滯,從而抑制腫瘤細胞的增殖。通過生物信息學(xué)分析及細胞功能實驗證實,miR-375可以在轉(zhuǎn)錄后水平抑制下游靶基因PDK1的表達。而回復(fù)PDK1在ESCC細胞中的表達則能夠逆轉(zhuǎn)miR-375引起細

5、胞周期阻滯的能力。因而PDK1介導(dǎo)了miR-375抑制ESCC細胞增殖的作用。
　　 綜上所述,我們的研究表明miR-133a,miR—143,miR-145與miR-375在食管黏膜重度不典型增生、原位癌及進展期ESCC中均下調(diào),可能與食管黏膜上皮的癌變相關(guān),且其改變是ESCC發(fā)生的早期事件,可以作為食管鱗癌早期診斷的潛在分子標志物。miR-375通過抑制PDK1的表達而發(fā)揮抑制食管癌細胞增殖的作用,可以為ESCC的早期診斷和