Galectin-1在滋養(yǎng)層干細胞增殖和分化中的表達與相關調控分子的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:妊娠過程中胚胎的植入、胎盤的形成和妊娠維持依賴于有序的滋養(yǎng)細胞增殖與分化。除胚胎遺傳缺陷等本身因素外,有研究表明胚胎著床失敗和早期妊娠丟失(EPL)等現(xiàn)象與滋養(yǎng)細胞增殖與分化不良有關,導致滋養(yǎng)細胞分化不良的機制至今未明。我們實驗室前期的蛋白質組學研究發(fā)現(xiàn)與正常對照組相比EPL患者半乳糖凝集素-1(Galectin-1,Gal-1)滋養(yǎng)細胞中表達顯著降低,這可能提示Gal-1在早期胎盤發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用。滋養(yǎng)層干細胞系(T

2、SC)與體內的滋養(yǎng)層細胞譜系的基因表達的模式相似,因此可通過TSC的培養(yǎng)和誘導分化模擬體內的細胞滋養(yǎng)層形成胎盤的過程,以研究滋養(yǎng)細胞在妊娠維持中相關機制。
  研究目的:運用小鼠滋養(yǎng)層干細胞增殖與分化模型,觀察Gal-1在滋養(yǎng)細胞增殖-分化進程中的表達及相關重要分子的關系,研究Gal-1在胚胎著床失敗和EPL中的作用機制,為尋求相關治療方法提供理論依據。
  研究方法:培養(yǎng)TSC并誘導其分化。采用qRT-PCR方法在mRNA

3、水平檢測TSC增殖和分化時產生的各細胞類型標志物。從mRNA水平和蛋白水平檢測Gal-1以及相關TSC融合分子在TSC增殖和分化過程中不同階段的表達變化。采用亞硫酸鹽測序的方法檢測Gal-1在TSC增殖分化過程中的啟動子的甲基化水平。
  研究結果:
  1、Gal-1在TSC分化3-5天mRNA和蛋白水平表達相對于干細胞狀態(tài)顯著升高。第四天mRNA表達最高,為干細胞狀態(tài)表達的2.04倍。
  2、Gal-1啟動子的甲

4、基化頻率隨分化下降,干細胞狀態(tài)甲基化頻率約1.4%,之后逐漸下降,至第五天達到最低,隨后上升至1%。
  3、TSC分化過程中Gal-1表達變化與啟動子甲基化頻率呈負相關關系,Gal-1表達隨分化上升,至第五天達到峰值,而甲基化頻率隨分化下降,至第五天達到最低值。
  4、Gal-1與細胞融合關鍵因子β-catenin表達呈負相關,TSC分化第三天和第四天Gal-1表達顯著增高時β-catenin表達顯著降低。
  研

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