白藜蘆醇對(duì)人食管癌EC9706細(xì)胞周期和凋亡的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的:食管癌是目前很常見(jiàn)和死亡率非常高的一個(gè)疾病，5年生存率只達(dá)20％。尋求一種高效低毒的抗腫瘤藥物是治療食管癌的當(dāng)務(wù)之急。白藜蘆醇（Resveratrol，Res）對(duì)體外培養(yǎng)的多種人類(lèi)腫瘤細(xì)胞存在一定的抑制和細(xì)胞毒作用。本研究以體外培養(yǎng)的食管癌EC9706細(xì)胞為研究對(duì)象，進(jìn)一步了解Res治療食管癌的效果并探討其作用機(jī)制，為預(yù)防和治療食管癌提供理論依據(jù)。
　　方法:不同濃度的Res處理體外培養(yǎng)的食管癌EC9706細(xì)胞并作用不同時(shí)間

2、。
　　1、MTT法分析Res對(duì)EC9706細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響作用;
　　2、倒置相差顯微鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變;電鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)微觀改變;
　　3、流式細(xì)胞術(shù)分析Res對(duì)EC9706細(xì)胞周期分布的影響;
　　4、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Res對(duì)EC9706細(xì)胞相關(guān)蛋白基因表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　1、MTT分析結(jié)果
　　不同濃度的Res對(duì)EC9706細(xì)胞的生長(zhǎng)均有抑制作用。當(dāng)作用時(shí)間一定時(shí)，隨著Res濃

3、度的增加， EC9706細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率呈逐漸上升，表現(xiàn)為劑量-效應(yīng)關(guān)系;當(dāng)Res濃度一定時(shí)，不同作用時(shí)間，抑制率也呈上升趨勢(shì)，表現(xiàn)為時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。
　　2、形態(tài)學(xué)變化
　　倒置顯微鏡下觀察，Res組與對(duì)照組比較，胞漿內(nèi)的顆粒增粗增多，細(xì)胞質(zhì)較少，細(xì)胞變圓變小，形態(tài)呈多樣性;透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)核染色質(zhì)濃縮邊集于核膜，電子密度增加，部分細(xì)胞膜向外層呈銳角突起，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有空泡化變性。
　　3、流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞凋亡的結(jié)果<

4、br>　　500μmol/ml、1000μmol/ml的白藜蘆醇作用于EC9706細(xì)胞72h后，G0/G1期前出現(xiàn)亞二倍體凋亡峰。凋亡率分別為9.54％±0.52％和19.85％±0.66％(p＜0.01)，用藥后的細(xì)胞G0/G1期比例增高，與未用藥組細(xì)胞的42.0％±1.23％相比，分別上升至59.5％±1.28％和68.5％±1.69％，而細(xì)胞的S期和G2/M期的比例均減小。
　　4、流式細(xì)胞術(shù)分析蛋白表達(dá)的結(jié)果
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