白藜蘆醇對人食管癌EC9706細胞周期和凋亡的影響及其作用機制.pdf

1、目的:食管癌是目前很常見和死亡率非常高的一個疾病，5年生存率只達20％。尋求一種高效低毒的抗腫瘤藥物是治療食管癌的當務之急。白藜蘆醇（Resveratrol，Res）對體外培養(yǎng)的多種人類腫瘤細胞存在一定的抑制和細胞毒作用。本研究以體外培養(yǎng)的食管癌EC9706細胞為研究對象，進一步了解Res治療食管癌的效果并探討其作用機制，為預防和治療食管癌提供理論依據(jù)。
　　方法:不同濃度的Res處理體外培養(yǎng)的食管癌EC9706細胞并作用不同時間

2、。
　　1、MTT法分析Res對EC9706細胞生長增殖的影響作用;
　　2、倒置相差顯微鏡下觀察形態(tài)學改變;電鏡下觀察細胞內微觀改變;
　　3、流式細胞術分析Res對EC9706細胞周期分布的影響;
　　4、流式細胞術檢測Res對EC9706細胞相關蛋白基因表達的影響。
　　結果:
　　1、MTT分析結果
　　不同濃度的Res對EC9706細胞的生長均有抑制作用。當作用時間一定時，隨著Res濃

3、度的增加， EC9706細胞的生長抑制率呈逐漸上升，表現(xiàn)為劑量-效應關系;當Res濃度一定時，不同作用時間，抑制率也呈上升趨勢，表現(xiàn)為時間-效應關系。
　　2、形態(tài)學變化
　　倒置顯微鏡下觀察，Res組與對照組比較，胞漿內的顆粒增粗增多，細胞質較少，細胞變圓變小，形態(tài)呈多樣性;透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)核染色質濃縮邊集于核膜，電子密度增加，部分細胞膜向外層呈銳角突起，細胞質內有空泡化變性。
　　3、流式細胞術分析細胞凋亡的結果<

4、br>　　500μmol/ml、1000μmol/ml的白藜蘆醇作用于EC9706細胞72h后，G0/G1期前出現(xiàn)亞二倍體凋亡峰。凋亡率分別為9.54％±0.52％和19.85％±0.66％(p＜0.01)，用藥后的細胞G0/G1期比例增高，與未用藥組細胞的42.0％±1.23％相比，分別上升至59.5％±1.28％和68.5％±1.69％，而細胞的S期和G2/M期的比例均減小。
　　4、流式細胞術分析蛋白表達的結果
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