高低鎂攝入對哮喘小鼠肺組織β-,2-受體低調(diào)節(jié)的影響.pdf

1、支氣管哮喘(簡稱哮喘)是由多種細(xì)胞(嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等)和細(xì)胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾患。這種慢性炎癥導(dǎo)致氣道高反應(yīng)性，通常出現(xiàn)廣泛多變的可逆性氣流受限，并引起反復(fù)發(fā)作性的喘息、氣急、胸悶或咳嗽等癥狀，常在夜間和(或)清晨發(fā)作、加劇，多數(shù)患者可自行緩解或經(jīng)治療緩解。 2006年版全球哮喘防治創(chuàng)議指出：哮喘的患病率和死亡率在世界范圍內(nèi)均呈明顯上升的趨勢。全球約有三億患者，我國至少有1500萬。

2、哮喘已經(jīng)成為一個嚴(yán)重的世界性社會公共衛(wèi)生問題。自Szentivanyi1968年提出β腎上腺素能受體(β AR)功能低下是哮喘發(fā)作的原因以來，許多學(xué)者對β AR在肺內(nèi)的分布、功能及哮喘時的改變進(jìn)行了廣泛深入的研究。Barnes研究豚鼠哮喘模型時發(fā)現(xiàn)哮喘組肺組織β AR數(shù)量較正常組顯著降低；高海鵬等研究提示發(fā)作期哮喘患者β AR最大結(jié)合量(Bmax)較正常人顯著降低。鎂是人體必需的常量元素之一。其含量在體內(nèi)僅次于鈉、鉀、鈣，居第4位。在細(xì)

3、胞內(nèi)則僅次于鉀，居第2位。體內(nèi)細(xì)胞約325種酶的活化需鎂參加，特別是與ATP代謝有關(guān)的酶。鎂還具有穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA和核糖體的作用，也是核糖體的重要組成成份，可促進(jìn)mRNA和70S核糖體結(jié)合，調(diào)節(jié)RNA合成酶，從而影響蛋白質(zhì)的合成。因此，鎂在生命活動中具有重要作用，被認(rèn)為是調(diào)控細(xì)胞生物活動的重要元素。 流行病學(xué)調(diào)查資料揭示：就一般人群而言，鎂的攝入量是影響肺功能，氣道高反應(yīng)性和喘息的一個獨(dú)立因素。攝入富含鎂的飲食可以改善肺

4、功能，發(fā)生喘息和氣道高反應(yīng)性的危險性也明顯減少。鎂攝入不足則有可能導(dǎo)致哮喘。本研究探討高低鎂攝入對非哮喘鼠/哮喘鼠肺組織β<,2>腎上腺素能受體(β<,2>AR)表達(dá)和β<,2>AR低調(diào)節(jié)的影響，旨為細(xì)胞鎂調(diào)控預(yù)防β<,2>AR低調(diào)節(jié)提供理論依據(jù)。 研究目的： 1．探討高低鎂攝入對小鼠肺組織β<,2>AR表達(dá)的影響。 2．探討高低鎂攝入對哮喘小鼠肺組織β<,2>AR低調(diào)節(jié)的影響。 第一部分高低鎂水平小鼠飼

5、料制作 目的：制作高低鎂水平小鼠飼料 方法： 將干酪素用1﹪乙二胺四乙酸(EDTA)二鈉洗滌后按低鎂飼料配方Diet＃93106，并略加改進(jìn)，配制低鎂飼料；在該配方中加入l﹪質(zhì)量硫酸鎂制作高鎂飼料。 結(jié)果： 低鎂飼料及高鎂飼料樣品各取5克，送至中山醫(yī)原子吸收光譜法檢測實(shí)驗(yàn)室檢測鎂含量，檢測結(jié)果低鎂飼料鎂含量為98.8 mg/kg；高鎂飼料鎂含量為2114.2 mg/kg。 結(jié)論：

6、成功制作了高低鎂水平小鼠飼料，低鎂飼料鎂含量為98.8 mg/kg；高鎂飼料鎂含量為2114.2 mg/kg。 第二部分高低鎂攝入對哮喘小鼠肺組織β<,2>受體低調(diào)節(jié)的影響 目的：探討高低鎂攝入對非哮喘鼠/哮喘鼠肺組織β<,2>AR表達(dá)和β<,2>AR低調(diào)節(jié)的影響。 方法： 健康4-6周齡清潔級雌性C57BL/6小鼠192只，體重12±2克，隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F、G、H8組，每組各24只。A、B

7、、C、D為非哮喘模型組，E、F、G、H為哮喘模型組。A、B、E、F組予低鎂飲食，C、D、G、H組予高鎂飲食。BDFH組腹腔內(nèi)注射硫酸沙丁胺醇注射液誘導(dǎo)β<,2>AR低調(diào)節(jié)，A、C、E、G組腹腔內(nèi)注射生理鹽水作對照。d<,1>、d<,21>、d<,34>天各組分別隨機(jī)抽取8只檢測血漿Mg<'2+>、紅細(xì)胞內(nèi)Mg<'2+>和肺組織β<,2>ARmRNA及蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 血漿Mg<'2+>(mmol/l)、紅細(xì)胞內(nèi)Mg<'

8、2+>(mmol/l)和肺組織β<,2>AR mRNA及蛋白(fmol/mg protein)表達(dá)：d<,1>各組間差異無顯著性(血漿Mg<'2+>：F值0.408，P值0.893；紅細(xì)胞內(nèi)Mg<'2+>：F值1.571，P值0.163：肺組織β<,2>ARmRNA：F值1.665，P值0.137；肺組織β<,2>AR蛋白：F值2.113，P值0.057)；d<,21>、d<,34>組間比較：C組顯著高于A組(d<,21>：0.95±0

9、.07 vs 0.73±0.08mmol/l、2.44±0.09 vs 2.32±0.09mmol/l、0.82±0.10 vs 0.61±0.04、96.6±7.1 vs 75.1±4.3fmol/mg protein：d<,34>：0.94±0.10 vs 0.69±0.14mmol/l、2.43±0.08 vs 2.26±0.13mmol/l、0.81±0.08 vs 0.58±0.06、99.2±7.5 vs 69.6±7.1f

10、mol/mg protein)(P均<0.05)；G組顯著高于E組(d<,21>：0.84±0.09 vs 0.57±0.10mmol/l、2.39±0.14 vs2.21±0.1lmmol/l、0.75±0.09 vs 0.59±0.06、88.5±8.5 vs 60.1±7.7fmol/mg protein：d<,34>：0.67±0.10 vs 0.51±0.09mmol/l、2.17±0.08 vs 2.05±0.09mmol/

11、l、0.61±0.05 vs 0.53±0.06、76.6±7.1 vs58.0±7.6fmol/mg protein)(P均<0.05)；D組顯著高于B組(d<,21>：0.92±0.09 vs 0.60±0.10mol/l、2.46±0.16 vs 2.13±0.16mmol/l、0.73±0.10 vs 0.52±0.03、97.4±7.9 vs 62.3±7.2fmol/mg protein：d<,34>：0.67±0.10 v

12、s 0.47±0.08mmol/l、2.07±0.12 vs 1.89±0.14mmol/l、0.62±0.05 vs 0.43±0.05、78.3±8.4 vs 45.1±7.3fmol/mg protein)(P均<0.05)；H組顯著高于F組(d<,21>：0.95±0.33 vs 0.46±0.09mmol/l、2.32±0.18 vs 1.87±0.14mmol/l、0.73±0.10 vs 0.43±0.07、96.9±8.

13、0 vs 47.9±4.9fmol/mg protein；d<,34>：0.71±0.10 vs 0.31±0.08mmol/l、1.66±0.13 vs 1.45±0.16mmol/l、0.40±0.07 vs 0.33±0.05、61.5±3.6 vs 35.3±7.1fmol/mg protein)(P均<0.05)。 結(jié)論： 1.低鎂攝入小鼠/哮喘小鼠肺組織β<,2>AR表達(dá)減少 2.高鎂攝入可抑制激動劑