卡介苗干預對IL-17A在哮喘小鼠肺組織中表達的影響及可能機制.pdf

1、背景：支氣管哮喘是由多種炎性細胞和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，以嗜酸性粒細胞浸潤為基本特征；但也有部分哮喘患者存在以中性粒細胞為主的氣道炎癥。已有多項研究證明在重度支氣管哮喘及糖皮質(zhì)激素依賴性、難治性支氣管哮喘患者的誘導痰及支氣管肺泡灌洗液(BALF)和黏膜組織中存在中性粒細胞增多現(xiàn)象。IL-17A對中性粒細胞有強大的化學趨化作用，可以顯著增加呼吸道內(nèi)中性粒細胞募集、活化而加重急性支氣管哮喘和慢性支氣管哮喘的急性發(fā)作。卡介苗(BC

2、G)作為結(jié)核桿菌的減毒活疫苗，具有很強的非特異性免疫刺激作用，能糾正Th1/Th2細胞因子平衡，使Th2型免疫反應向Th1型免疫反應逆轉(zhuǎn)，減輕氣道炎癥反應。卡介苗干預是否能夠通過糾正Th1/Th2細胞因子平衡，上調(diào)Th1型免疫反應增加IFN-γ而減少IL-17A在肺組織中的表達，減少對中性粒細胞的募集活化、減輕氣道炎癥反應尚未見報道。
　　 目的：通過建立小鼠哮喘模型，給小鼠進行預防性接種BCG，觀察BCG干預對IL-17A在哮

3、喘小鼠肺組織表達的影響，探討其可能的機制。
　　 方法：2月齡大小的24只雄性昆明小鼠隨機分成正常對照（A組），哮喘組（B組），BCG干預組（C組）。通過卵清蛋白致敏建立哮喘模型。觀察3組小鼠的一般情況；肺泡灌洗液的細胞分類；肺組織的病理切片；運用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)檢測肺組織勻漿中的IL-17A和IFN-γ水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.BALF檢查顯示：
　　 哮喘組（B組）與對照組（A組

4、）比較，BALF中白細胞總數(shù)及中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞數(shù)均明顯升高(P＜0.01)。BCG干預組（C組）與哮喘組（B組）比較，BCG能明顯降低BALF中白細胞總數(shù)及中性粒細胞、嗜酸性粒細胞比例(P＜0.01)。
　　 2.病理檢查顯示：
　　 病理學HE染色發(fā)現(xiàn)：對照組（A組）小鼠肺內(nèi)幾乎無炎性細胞浸潤；而哮喘組（B組）小鼠肺內(nèi)可見大量炎性細胞和浸潤，其炎性細胞浸潤程度與對照組（A組）比較明顯增加(P＜0.01

5、)。BCG干預組（C組）干預后，炎性細胞浸潤程度較哮喘組（B組）明顯降低(P＜0.01)，但仍然比對照組（A組）嚴重(P＜0.01)。
　　 3.酶聯(lián)免疫吸附試驗結(jié)果顯示：
　　 哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度顯著低于對照組（A組），哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IL-17A濃度顯著高于對照組（A組）（P均＜0.01）；BCG干預組（C組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度低于對照組（A組），肺組織勻漿中

6、的IL-17A濃度高于對照組（A組）（P均＜0.05），其差異均有統(tǒng)計學意義。哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度低于BCG干預組（C組），其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IL-17A濃度高于BCG干預組（C組），其差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4.相關(guān)分析顯示：
　　 哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度與氣道炎癥呈顯著負相關(guān)(r＝-0.956,P＜0

7、.01)，與肺泡灌洗液中性粒細胞數(shù)呈顯著負相關(guān)(r＝-0.955,P＜0.01)；哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IL-17A濃度與氣道炎癥呈顯著正相關(guān)(r＝0.811,P＜0.05)，與肺泡灌洗液中性粒細胞數(shù)呈顯著正相關(guān)(r＝0.915,P＜0.01)；哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度與肺組織勻漿中的IL-17A濃度呈顯著負相關(guān)(r＝-0.884,P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.在支氣管哮喘小鼠