與急性冠脈綜合癥發(fā)生密切相關(guān)的易損斑塊的病理組織學(xué)，PECAM-1、E-selectin蛋白的免疫組化及基因多態(tài)性研究.pdf

1、背景資料：心血管病長(zhǎng)期以來(lái)一直是發(fā)達(dá)國(guó)家的首位死亡原因，并且已經(jīng)成為發(fā)展中國(guó)家老年人的頭號(hào)殺手．ACS發(fā)病的不可預(yù)料性和致死率之高，成為學(xué)者們爭(zhēng)相研究的課題。近些年對(duì)ACS患者斑塊的研究，提出了易損斑塊的概念及診斷標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于炎癥在易損斑塊中的作用重新評(píng)價(jià)。并且由于由于分子基因?qū)W科的發(fā)展，對(duì)于鑒別與AS相關(guān)的基因危險(xiǎn)因素或基因多態(tài)性已廣為開(kāi)展。 目的：觀察易損斑塊在ACS患者中的病理組織學(xué)特點(diǎn)；黏附分子PECAM-1．E-sele

2、ctin在斑塊中的表達(dá)，及其基因多態(tài)性與急性冠脈綜合癥患者的關(guān)系。 材料及方法：本研究回顧了北京醫(yī)院1992年-2006年來(lái)近800例尸檢，選取其中臨床病史清晰、檢查詳細(xì)、診斷明確的患者，分為ACS組67例：包括不穩(wěn)定心絞痛、心肌梗死、心源性猝死；與其年齡、性別相匹配的臨床表現(xiàn)沒(méi)有ACS的病例60例，1．從斑塊的形態(tài)有無(wú)血栓、粥池最大橫切面占斑塊面積、纖維帽最小厚度、炎細(xì)胞浸潤(rùn)密度等十個(gè)方面進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，按照修改的美國(guó)心臟協(xié)會(huì)

3、分類及03年發(fā)表的美國(guó)心臟協(xié)會(huì)的協(xié)定，觀察ACS患者易損斑塊發(fā)生情況，形態(tài)學(xué)特點(diǎn)；2．應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)黏附分子PECAM-1、E-selectin在斑塊中的表達(dá)規(guī)律。3．分別應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)．單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-SSCP)及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)的技術(shù)對(duì)ACS組及對(duì)照組標(biāo)本進(jìn)行了PECAM-1的Leul25Val，E-selectin的Serl28Arg基因多態(tài)性的分析。 結(jié)果：1.

4、形態(tài)學(xué)觀察：在ACS組各指標(biāo)檢出率分別為大脂核153塊(50.20％)，薄纖維帽187塊(61-31％)，有炎細(xì)胞浸潤(rùn)263塊(86.23％)，可見(jiàn)新生血管217塊(71.15％)，嚴(yán)重狹窄26塊(8.52％)，有鈣化238塊(78.03％)，有鈣化小結(jié)26塊(8.52％)，斑塊破裂12塊(3.93％)，斑塊糜爛3塊(0.98％)及斑塊內(nèi)出血54塊(17.74％)，除斑塊糜爛外均比對(duì)照組顯著增加，各組P值<0.01。(2)ACS組和對(duì)照

5、組易損斑塊發(fā)生率分別為89.5％和22.0％。對(duì)一個(gè)患者多處斑塊觀察，ACS組，每個(gè)病例平均觀察4.55個(gè)切面，其中有4.07個(gè)為易損斑塊，且炎細(xì)胞浸潤(rùn)密度大；對(duì)照組每個(gè)病例觀察3.87個(gè)切面，易損斑塊只有O.85個(gè)，而且炎癥程度較輕。2.免疫組化染色結(jié)果：(1)黏附因子PECAM-1、E-selectin的表達(dá)在兩組病例中是有明顯差異的，PECAM.1在ACS組和對(duì)照組內(nèi)膜處表達(dá)分別為38例(76％)、8例(26.67％)；E.sel

6、ectin在ACS組表達(dá)13例(26％)，但在對(duì)照組不論冠脈內(nèi)皮細(xì)胞還是新生血管內(nèi)皮細(xì)胞都不表達(dá)。(2)PECMA-1及E-selectin在內(nèi)膜處的分布也有一定規(guī)律。特別在ACS組，在新生血管內(nèi)皮細(xì)胞處的表達(dá)比在冠脈內(nèi)皮細(xì)胞處的表達(dá)例數(shù)明顯增加，PECAM-1：58％→28％；E-selectin：22％→12％。(3)在41塊有炎細(xì)胞浸潤(rùn)的蠟塊中，PECAM-1和E-selectin在炎細(xì)胞的密度分別為<10、10-30及>30/H

7、PF時(shí)，陽(yáng)性表達(dá)率分別為33.33％、68.18％及 92.31％；16.67％、31.81％和23.08％；基本有隨炎細(xì)胞密度的增加而增加的趨勢(shì)。3.基因型檢測(cè)結(jié)果：(1)ACS組與對(duì)照組相比，PECAM-1的等位基因頻率373G：C→5 1.4％：48.6％，對(duì)照組29.1％：70.9％，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異。(p<0.05)，ACS組基因型純合子G/G21.6％Lg對(duì)照組7.0％高，但是p<0.05，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)E-sele

8、ctin在ACS組中561位出現(xiàn)突變C/C純合子，有4例(10.3％)，與對(duì)照組相比統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義(p<0.05)。而且等位基因C出現(xiàn)的頻率在ACS組達(dá)到16.7％，比對(duì)照組2.3％提高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異(p<0.05)。 結(jié)論：1.進(jìn)一步證實(shí)急性冠脈綜合癥患者易損斑塊的發(fā)生率明顯增高，提示易損斑塊的形成是急性冠脈綜合癥發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素。2.易損斑塊的主要形態(tài)學(xué)特點(diǎn)是大脂核、薄纖維帽、大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)、大量新生血管形成，血管腔嚴(yán)重

9、狹窄、斑塊破裂及內(nèi)皮細(xì)胞變性、壞死及脫落。這些提示炎性反應(yīng)可能在易損斑塊的形成中起到重要作用。3.免疫組化證實(shí)黏附因子PECAM-1和E-selectin在ACS組易損斑塊冠狀動(dòng)脈內(nèi)膜處表達(dá)增加，且在新生血管處的表達(dá)比在冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞明顯增高，并有隨炎細(xì)胞密度的增加而表達(dá)增強(qiáng)的趨勢(shì)，提示粘附因子PECAM-1和E-selectin可能和炎性反應(yīng)及易損斑塊的形成有關(guān)。4.PECAM-1的C+373GLeul25Val)的G等位基因頻率在