乙醇在大鼠體內(nèi)的代謝動力學及其對大鼠行為學影響的相關機制研究.pdf

1、背景與目的:
　　近年來,隨著人民生活水平的提高,乙醇的飲用也越來越多,由此而引發(fā)的各種民事和刑事案件以及交通事故也呈上升趨勢。國內(nèi)外已有多項慢性乙醇中毒的相關研究報道,但對于急性乙醇中毒所致行為學改變及相關機制的實驗研究較少。急性飲酒后,對人體的各個大系統(tǒng)如血液系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等均有不同程度的影響,乙醇在體內(nèi)的代謝也受種族、性別、飲酒量等多種因素的影響。眾所周知,乙醇達到一定的濃度后會影響人對自身行為的控制能力,但對

2、于飲用多少灑精可對駕駛行為構成危害方面,目前的研究結論仍存在矛盾;我國在有關交通法規(guī)中規(guī)定了酒后駕車和醉酒駕車的標準和處罰辦法,由于人體乙醇代謝的作用,可能在發(fā)生事故時人體乙醇含量是達到酒后駕車標準的,但檢測時可能達不到標準,使駕車者逃避懲罰。因此,進一步研究乙醇對行為學的影響及其作用機制,了解行為學的改變與乙醇在體內(nèi)代謝的關系,具有較高的實踐意義及臨床意義。
　　方法:
　　1.分別按4ml/kg、8ml/kg、16ml/

3、kg的乙醇體重比對大鼠進行灌胃,制作低、中、高劑量急性乙醇中毒模型,對照組給予相應體積的生理鹽水。
　　2.通過電Y迷宮觀察大鼠在不同濃度乙醇及時間作用下行為學的改變。
　　3.采用免疫組織化學技術檢測不同劑量乙醇作用下大鼠腦神經(jīng)細胞中c-fos、c-jun的表達。
　　4.采用氣相色譜對大鼠進行乙醇濃度檢測,根據(jù)乙醇在大鼠體內(nèi)的代謝推算出房室模型及藥代動力學參數(shù)。
　　5.統(tǒng)計學處理采用SPSS10.0軟件包進

4、行統(tǒng)計分析,計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)士標準差((?)±s)表示,符合正態(tài)分布和方差齊時組間比較采用單因素方差分析、LDS~t檢驗,非正態(tài)分布和方差不齊時采用非參數(shù)檢驗,相關性分析采用Pearson檢驗,檢驗水準為α=0.05。
　　結果:
　　1.大鼠行為學的改變:灌胃后0h各個組別大鼠逃避電擊反射的出錯次數(shù)均在正常范圍,組間比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05);灌胃后0.5h、1h、2h、4h、8h、12h大鼠逃避電擊反射的出錯次數(shù)

5、有不同程度的變化,組間比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05);灌胃后24h各組大鼠逃避電擊反射的出錯次數(shù)基本恢復正常,組間比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。隨著時間的變化,各組大鼠逃避電擊反射的出錯次數(shù)呈現(xiàn)一定的規(guī)律性,4ml/kg組在灌胃2h逃避電擊反射的出錯次數(shù)最多,8ml/kg組、16ml/kg組在在灌胃后4h逃避電擊反射的出錯次數(shù)最多,隨著時間的增加,4ml/kg組、8ml/kg組、16ml/kg組分別在灌胃8h、12h、24h基本恢

6、復正常。
　　2.大鼠腦組織HE染色變化:對照組、低劑量組各時間點腦組織病理變化不明顯;中劑量組4h、8h變化較明顯,可見腦實質(zhì)內(nèi)血管擴張、充血,神經(jīng)細胞周圍及小血管周圍腔隙增寬;高劑量組變化最明顯,2h、4h、8h時見腦實質(zhì)內(nèi)血管擴張、充血,神經(jīng)細胞周圍及小血管周圍腔隙增寬明顯,胞漿淡染,個別區(qū)域內(nèi)有散在的紅細胞。
　　3.c-fos、c-jun在大鼠腦神經(jīng)細胞的表達:免疫組化陰性對照組可見細胞核呈淡藍色;陽性反應主要位于

7、細胞核內(nèi)。用陽性細胞計數(shù)法反映陽性反應的強度,表達情況不盡相同。隨著時間的變化,c-fos、c-jun呈現(xiàn)一定的規(guī)律,大鼠乙醇灌胃2h后各組別均有c-fos、c-jun的表達,4h時中、高劑量組c-fos、c-jun表達較強,胞核染色較深,與實驗對照組、低劑量組相比均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),至8h表達有所下降,低劑量組恢復至實驗對照組水平,24h時中劑量組c-fos、c-jun表達也恢復至對照組水平。
　　4.大鼠藥代動力學

8、方法學考察:血液中雜質(zhì)不干擾乙醇的檢測,本方法專屬性、重現(xiàn)性、準確性、穩(wěn)定性、分離度良好,符合生物樣品的測定要求,可用于測定大鼠血漿中乙醇的含量。
　　5.不同劑量組藥動學參數(shù)的差異:和藥物吸收分布有關的參數(shù)Cmax、V、AUC各組間比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05),對劑量依賴型參數(shù)Cmax、AUC和給藥劑量間相關性進行檢驗,結果給藥劑量和Cmax、AUC呈正相關,相關系數(shù)分別為0.512(P<0.01)、0.688(P<0.01

9、),各參數(shù)均隨給藥劑量的增加而增大,與給藥劑量間存在明顯的正相關關系。和藥物消除有關的速率常數(shù),Ke,T1/2ke各組間比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05),CL各組間比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結論:
　　1.急性乙醇中毒可引起大鼠學習記憶功能障礙,其程度與乙醇濃度有關,同時與作用時間也有密切關系;相同乙醇濃度灌胃后,大鼠逃避電擊反射的出錯次數(shù)在不同的時間也有差異。
　　2.乙醇可誘導腦神經(jīng)細胞中c-fos、