Baicalein對MIO-M1細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:研究黃苓素(5，6，7-三羥基黃酮，Baicalein)對H2O2及VitK3引起的人視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用，探討B(tài)aicalein在年齡相關(guān)性黃斑變性(Age Related Macular Degeneration，AMD)防治中的應(yīng)用可能性。
　　 方法:體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞系MIO-M1細(xì)胞，待接種細(xì)胞生長接近融合時(shí)分為4組接種鋪板實(shí)驗(yàn):空白對照組（正常培養(yǎng)）、過氧化氫(H2O2)組，

2、Baicalein組、Baicalein+H2O2組?？瞻讓φ战M:培養(yǎng)液換為不含血清的DMEM培養(yǎng)基;H2O2組:以含有H2O2（濃度分別為10、20、40、60、80、100μmol/L）的無血清DMEM培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，尋找合適的H2O2濃度，用以造成氧化損傷模型;Baicalein組:以含有Baicalein（濃度分別為0.5、1、2、5、10、20、50μmol/L）的無血清DMEM培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，檢測Baica

3、lein對細(xì)胞生長的影響;H2O2+Baicalein組:以含有Baicalein（濃度分別為0.5、1、2、5、10、20、50μmol/L）的無血清DMEM培養(yǎng)液預(yù)作用1小時(shí)，加入根據(jù)H2O2組實(shí)驗(yàn)結(jié)果選定濃度（8μmol/L）的H2O2，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，以MTT法檢測細(xì)胞活性，從而評價(jià)細(xì)胞氧化損傷的變化情況。Baicalein對維生素K3(vitaminK3，VitK3)引起的人視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)方法參

4、照上述方法，VitK3的實(shí)驗(yàn)濃度為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10μmol/L。
　　 結(jié)果:1.H2O2組與空白對照組相比較，MIO-M1細(xì)胞的活性隨H2O2濃度增加而降低，從濃度40μmol/L開始差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;H2O2濃度為80μmol/L時(shí)細(xì)胞活性為空白對照組的47.12％，選作下一步的實(shí)驗(yàn)濃度。Baicalein組與空白對照組比較，MIO-M1細(xì)胞活性在小于等于10μmol/L無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，即MIO-

5、M1對細(xì)胞的增殖無明顯影響，20μmol/L后細(xì)胞的活性隨Baicalein濃度增加而降低，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。過氧化損傷實(shí)驗(yàn)中，Baicalein干預(yù)組的細(xì)胞活性較H2O2組升高，在Baicalein濃度為1～20μmol/L時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在Baicalein5μmol/L濃度時(shí)活性最高。2.VitK3組與空白對照組相比較，MIO-M1細(xì)胞的活性隨VitK3濃度先增加而后降低，濃度為4μmol/L及5μmol/L時(shí)細(xì)胞活性增高

6、，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;VitK3自7μmol/L起細(xì)胞活性下降，濃度為8μmol/L時(shí)細(xì)胞活性為空白對照組的54.12％，選作下一步的實(shí)驗(yàn)濃度。Baicalein干預(yù)組的細(xì)胞活性較VitK3組升高，在Baicalein濃度為2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在Baicalein為5μmol/L濃度時(shí)活性最高。
　　 結(jié)論:Baicalein對H202及VitK3誘導(dǎo)的MIO-M1細(xì)胞的氧化損