鼻咽癌時(shí)辰放療與拓?fù)涮婵禃r(shí)辰放射增敏的機(jī)制研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過研究鼻咽癌組織乏氧狀況的晝夜節(jié)律，來(lái)探討鼻咽癌時(shí)辰放療的效應(yīng)是否與癌組織的乏氧程度有關(guān)，從而為鼻咽癌時(shí)辰放療提供理論依據(jù)。另外，我們的前期實(shí)驗(yàn)研究表明，拓?fù)涮婵悼梢栽黾颖茄拾┑姆派涿舾行裕錂C(jī)制與拓?fù)涮婵狄种颇[瘤細(xì)胞拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)有關(guān)。而且不同時(shí)辰進(jìn)行放射增敏，療效有顯著性差異，本實(shí)驗(yàn)通過研究其作用靶點(diǎn)(DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I)的晝夜表達(dá)節(jié)律，來(lái)探討拓?fù)涮婵祵?duì)鼻咽癌放射增敏時(shí)辰效應(yīng)機(jī)制。 方法：40只Balb/C雌

2、性裸小鼠在統(tǒng)一光照條件下(光照時(shí)間7：00～19：00，黑暗時(shí)間19：00～7：00)飼養(yǎng)，同步化至少3周以上。建立統(tǒng)一的生物節(jié)律以后，在裸鼠雙側(cè)腋下接種低分化鼻咽癌細(xì)胞(CNE-Ⅱ)，建立鼻咽癌移植瘤的腫瘤模型。成瘤并達(dá)到入組標(biāo)準(zhǔn)后，按隨機(jī)數(shù)目表法分為四組，在10am，4pm，10pm，4am(即3、9、15、21HALO，hours after light onset)四個(gè)時(shí)辰點(diǎn)分批取出瘤塊，福爾馬林固定、石蠟包埋，制成組織切片。采

3、用免疫組織化學(xué)的方法分別檢測(cè)四個(gè)時(shí)辰腫瘤組織的乏氧程度和拓?fù)洚悩?gòu)酶I的表達(dá)水平，并進(jìn)行免疫組化圖像定量分析。然后采用完全隨機(jī)單因素方差分析法(ANOVA法)分析四個(gè)時(shí)辰點(diǎn)腫瘤組織的乏氧狀況和拓?fù)洚悩?gòu)酶I的表達(dá)水平差異的顯著性；并采用q檢驗(yàn)(Student-Newrman-Keuls法，SNK法)進(jìn)行組間兩兩比較，檢驗(yàn)兩兩組間差異的顯著性。 結(jié)果：鼻咽癌組織在3，9，15，21 HALO的乏氧程度隨時(shí)間變化有顯著性差異(P<0.0

4、5)，峰值位于3～9HALO，低值位于15～21HALO。但3HALO和9HALO兩個(gè)時(shí)辰點(diǎn)之間腫瘤乏氧程度的差異無(wú)顯著性，15HALO和21HALO兩個(gè)時(shí)辰點(diǎn)之間差異無(wú)顯著性。從數(shù)據(jù)來(lái)看，乏氧程度最高的時(shí)辰點(diǎn)9HALO的PI值(positive index，陽(yáng)性指數(shù)，免疫組化定量指標(biāo))為29.36±6.75，而乏氧程度最低的時(shí)辰點(diǎn)21HALO的PI值為18.55±3.96，9HALO的腫瘤乏氧程度較21HALO高了將近1.6倍。鼻咽癌

5、組織中DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的表達(dá)水平也隨時(shí)間變化有顯著性差異(P<0.05)，峰值位于15HALO，其余的三個(gè)時(shí)辰點(diǎn)之間DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的表達(dá)水平無(wú)顯著性差異。從數(shù)據(jù)來(lái)看，DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)水平最高的時(shí)辰點(diǎn)15HALO的PI值為26.79±6.81，而DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)水平最低的時(shí)辰點(diǎn)21HALO的PI值為19.06±3.63，15HALO的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)水平較21HALO高了約1.4倍。 結(jié)論：人鼻咽癌裸鼠移植

6、瘤的乏氧狀況隨晝夜交替呈節(jié)律性變化。其中腫瘤乏氧程度在3～9HALO最強(qiáng)，15～21HALO最弱。鼻咽癌時(shí)辰放療療效的差異與腫瘤組織不同時(shí)辰的乏氧程度高度相關(guān)。這初步為鼻咽癌的時(shí)辰放療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。人鼻咽癌裸鼠移植瘤的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)水平也隨晝夜交替呈節(jié)律性變化。其中拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)水平峰值位于15HALO，其余三個(gè)時(shí)辰點(diǎn)的之間無(wú)顯著性差異。這為在拓?fù)洚悩?gòu)酶I表達(dá)的峰值15HALO實(shí)行放射增敏療效最佳提供了實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。因此我們認(rèn)