hK7增加DU145體外侵襲力并改變其細胞生長形態(tài).pdf

1、背景：本課題組在前期一個國家自然科學(xué)基金資助項目的研究中發(fā)現(xiàn)：KLK7在有或無間質(zhì)共培養(yǎng)的良性前列腺增生上皮細胞中差異表達KLK7編碼的蛋白為hK7。hK7與PSA都是分泌性、具有糜蛋白酶樣活性的絲氨酸蛋白酶，兩者的編碼基因都屬于kallikrein基因家族，hK7最早被報道在皮膚角質(zhì)層中表達，可促進皮膚脫屑過程。其主要機制是hK7通過降解細胞間的連接結(jié)構(gòu)，降低細胞附著力，從而使表皮細胞脫落。腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的起點或者說重要環(huán)節(jié)之一就是

2、首先癌細胞從原發(fā)部位脫落。hK7對前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移等惡性表型是否有影響，目前尚未見有報道。目的：研究hK7對前列腺癌細胞惡性表型的影響，探索hK7的潛在臨床應(yīng)用價值。 方法： 1．首先利用基因克隆等分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建hK7的重組表達載體pcDNA3.1-KLK7： 2．然后重組載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染前列腺癌細胞系22RV1及DUl45，在前列腺癌細胞中穩(wěn)定表達hK7蛋白，獲得的研究對象用于表型測定和觀察； 3．最后

3、，測定并觀察hK7對前列腺癌細胞系生長、侵襲、克隆形成能力和細胞形態(tài)等腫瘤相關(guān)表型的影響。 結(jié)果： 1．成功構(gòu)建hK7的重組表達載體； 2．在前列腺癌細胞系中穩(wěn)定表達hK7； 3．表達hK7對前列腺癌細胞系生長增殖無顯著影響； 4．表達hK7對DU145體外形成克隆的個數(shù)無明顯影響； 5．hK7顯著增強DU145體外侵襲基質(zhì)膠的能力； 6．初步結(jié)果表明，hK7促使DU145發(fā)生類上