亞毒性劑量THP聯(lián)合TRAIL對(duì)前列腺癌細(xì)胞Du145體外生長(zhǎng)影響的研究.pdf

1、目的：通過(guò)研究亞細(xì)胞毒性劑量的化療藥物吡柔比星（THP）和腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）對(duì)前列腺癌體外生長(zhǎng)的影響，探討兩藥單獨(dú)用藥和聯(lián)合用藥對(duì)人前列腺癌細(xì)胞Du145體外生長(zhǎng)的影響，為TRAIL抗腫瘤作用的臨床應(yīng)用提供一個(gè)新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，可能為激素難治性前列腺癌的治療尋求一種新的方案。
　　方法：常規(guī)方法培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞Du145，給予不同濃度的THP和TRAIL，分為單用THP組、單用TRAIL組、THP+TRAIL

2、聯(lián)合組、對(duì)照組和空白組。各組影響因素作用24小時(shí)后，采用MTT比色法測(cè)定不同藥物濃度作用后，各組細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率，同時(shí)選定THP的亞毒性劑量。倒置相差顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化以及生長(zhǎng)情況，再采用Annexin V/PI雙染色法進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞Du145的凋亡率。各組藥物刺激后，提取Du145細(xì)胞胞漿蛋白，采用Western-Blot法進(jìn)行蛋白印跡顯影，檢測(cè)各組細(xì)胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3的表達(dá)。
　　結(jié)果：<

3、br>　　1、THP和TRAIL對(duì)人前列腺癌細(xì)胞株Du145均有抑制生長(zhǎng)作用，THP的抑制作用較強(qiáng)，Du145細(xì)胞對(duì)其相對(duì)敏感。TRAIL雖有抑制作用，但Du145細(xì)胞對(duì)TRAIL并不敏感。
　　2、亞毒性劑量的THP聯(lián)合不同藥物濃度的TRAIL對(duì)Du145細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用，并且呈現(xiàn)出較高的協(xié)同作用，其協(xié)同因子均大于1,最大協(xié)同因子CF=1.38807。
　　3、倒置相差顯微鏡下觀察不同藥物濃度刺激下，細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的

4、死亡。見(jiàn)附圖。
　　4、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)藥物刺激后出現(xiàn)不同程度的凋亡，THP+TRAIL聯(lián)合組凋亡率最高。同時(shí)證明了協(xié)同殺傷作用是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的。
　　5、采用Western-Blot法檢測(cè)藥物刺激后Du145細(xì)胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3蛋白的表達(dá)，顯影后可見(jiàn)THP+TRAIL聯(lián)合組刺激后的細(xì)胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3蛋白明顯高于單用藥物組和對(duì)照組。見(jiàn)附圖。
　　結(jié)論：THP和TRAIL對(duì)人前列腺癌細(xì)