表達SATB1基因的重組質粒對前列腺癌DU145細胞增殖和侵襲力影響的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：構建表達SATB1基因的重組質粒pcDNA3.1-SATB1，研究其對人前列腺癌DU145細胞增殖和侵襲力的影響，為進一步探討SATB1基因在前列腺癌發(fā)病機制中的作用及靶向SATB1基因治療前列腺癌奠定基礎。
　　方法：1.構建質粒pcDNA3.1-SATB1；
　　2.利用LipofectamineTM2000將pcDNA3.1-SATB1轉染人前列腺癌DU145細胞，以空質粒pcDNA3.1及空白細胞作對照組；

2、r>　　3.RT-PCR檢測DU145細胞SATB1基因mRNA表達；
　　4.Western blot檢測DU145細胞中SATB1蛋白表達；
　　5.CCK8檢測DU145細胞增殖情況；
　　6.Transwell檢測DU145細胞侵襲能力。
　　結果：1.瓊脂糖凝膠電泳及測序表明pcDNA3.1-SATB1質粒構建成功；
　　2.轉染pcDNA3.1-SATB1基因12h、24h、36h后DU145細

3、胞SATB1mRNA表達水平為(170.3±2.1)％、(246.9±5.3)％、(304.5±9.9)％均顯著高于空質粒pcDNA3.1組、空白細胞組(116.4±4.4、115.5±2.4)％(P<0.01)；
　　3.轉染pcDNA3.1-SATB1基因12h、24h、36h后DU145細胞SATB1蛋白表達水平為(34.3±0.6)％、(47.0±1.0)％、(61.5±1.2)％均顯著高于兩對照組(22.9±0.1)％、

4、(22.6±0.2)％(P<0.01)；
　　4.轉染pcDNA3.1-SATB1基因24h、48h、72h后DU145細胞增殖率分別為(25.3±2.6)％、(37.1±3.7)％、(64.6±2.9)％均顯著高于空質粒對照組(10.7±1.2)％、(12.1±1.2)％、(13.3±1.1)％(P<0.05)；
　　5.Transwell侵襲實驗結果顯示轉染pcDNA3.1-SATB1組侵襲細胞數(shù)為288.3±4.5，顯

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