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文檔簡介
1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文不同濃度富血小板血漿應(yīng)用于骨組織工程的研究姓名:潘永海申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)(頜面外科)指導(dǎo)教師:李寧毅20060513APPLICATIONoFPLATELETRICHPLASMAoFDIFFERENTCONCENTRATloNSINBoNETISSUEENGINEERING【Abstract1ObjectiveToobserveinvitrotheeffectsofplateletriehplasm
2、a(PRP)ofdifferentconcentrationsontheproliferation,differentiation,andmRNAofautologousboneinarrowstromalcells(MSCs)toevaluatetheboneinductioneffectofH啦onMSCs,andtoinvestigatethefeasibilityofbonetissueregenerationbytissuee
3、ngineeringwi也theobtainedoptimalconcentrationMethodsTwotimesofcentrifugationwasusedtoextractPRPfromthevenousbloodofthedogsandthebloodcountwasperformedfnleserumrichingrowthfactors(SRGF)wereactivatedandpreparedwithserumfree
4、D—MEM/F12solutiontogetl%,5%,10%,20%,and30%SRGFDensitygradientcenlrifugationWasappliedtOextractandcultureMSCsofthedogsandgeneratedwhichWasobservedandphotographedeverydayTheeffectsofPRPofdifferentconeentrations(1%,5%,10%,2
5、0%,and30%)onMSCsproliferationwe陀observedwithMITondays1,3,5,7,and9EnzymekineticswasusedtOd鼬ecttheeffectofPRPofdifferentconcentrationsOnALPactivityondays3,6,9,and12ALPstainingwasperformedwithimprovedOomoristainingtestonPRP
6、indncedMSCs耵七formationof加in啪Ⅱ蹬dnoduleswasdetectedwithDam]vfcGl鷺Russll$alizarinredstainThecontentsofosteoealcinwerc0bservedondays7,1421,and28Semiquantitative“I、圯讎廿anseripfionpolymerasechainreaction(RTPCm)wasusedtodetectth
7、eAI,PmRNAandoCNmRNAlevelsinPRPandrhBMPinducedMSCsResultsAdherenceoftheMS(=saftertheprimaryculturebegantoOeCIIl“at2448handthecellsblendedintoamonolayer12dlaterMostofthecellsassumedfibroblastfusiformcellsAftertheinductionw
8、ithPRPthecellsincreasedsignificantlyandgraduallychangedintosquareOrpolygonandmeltedintomonolayer鉗dlaterandmultilayer812dlatern特plateletcountshowedthattheplateletconcentrationinPRPWas538timesthatinthewholeblood^d1Tdetecti
9、onshowedthatvariouslevelsofproliferationoccurredinallthePRPgroupsespeciallyinthe10%PRPgroupEnzymekineticsdetectionshowedthattheAIJPactivityincreasedinallthePRPgroupsespeciallyinthe10%PRPandrhBMPgroupsForthePRPinducedMSCs
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