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不同濃度凝血酶對富血小板血漿促顱骨缺損修復(fù)影響的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究不同濃度凝血酶對富血小板血漿(PRP)促骨髓基質(zhì)細胞增殖作用的影響,得出促細胞增殖作用的最佳凝血酶濃度,并與常用凝血酶濃度1000U/ml比較,觀察不同濃度凝血酶對PRP修復(fù)顱骨缺損的影響。 方法:1.抽取新西蘭兔全血制取PRP,按PRP與凝血酶9∶1(v/v)加入下列濃度的凝血酶:20U/ml、40U/ml、60U/ml、80U/ml、100U/ml、500U/ml和1000U/ml,制取復(fù)合生長因子;抽取同只新西蘭

2、兔骨髓,在體外培養(yǎng)擴增,取生長良好的第三代骨髓基質(zhì)細胞,1×104個細胞/孔植入96孔板中,加入含前述生長因子的10%胎牛血清(FBS)的DMEM液、10%FBS的DMEM液(陽性對照組)及無血清的DMEM液(陰性對照組),用MTT法檢測細胞增殖情況,得出促細胞增殖的最佳凝血酶濃度A。2.分別在16只新西蘭兔顱骨頂部制備4個直徑為8mm的全厚層骨缺損,按隨機法采用:1000U/ml濃度凝血酶+PRP+β-TCP、A凝血酶+PRP+β-T

3、CP、PRP+β-TCP、β-TCP(空白)等治療修復(fù),分別于術(shù)后1個月和3個月取標本,用組織病理學(xué)法觀察顱骨修復(fù)情況。 結(jié)果:1.不同濃度凝血酶激活的PRP均能促進骨髓基質(zhì)細胞的增殖,作用明顯優(yōu)于對照組(P<0.05),20U/ml~60U/ml時呈濃度依賴關(guān)系,60U/ml為最佳濃度。2.不同濃度凝血酶激活的PRP修復(fù)顱骨缺損情況:術(shù)后1個月各組新骨生成百分數(shù):1000U/ml組為20.43±2.28%、60U/ml組為21

4、.26±1.41%、單純PRP組為21.05±3.42%、空白組為17.33±3.15%;術(shù)后3個月各組新骨生成百分數(shù):1000U/ml組為36.29±4.01%、60U/ml組為35.89±3.65%、單純PRP組為42.61±4.86%、空白組為31.57±4.02%。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果顯示:術(shù)后1個月PRP各組新骨生成百分數(shù)均高于空白組(P<0.05),但PRP三組間差別無顯著性;術(shù)后3個月PRP各組新骨生成百分數(shù)亦高于空白組(P<0

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