屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)小鼠糞便微生物組成和免疫功能的影響以及人工瘤胃評(píng)價(jià)其對(duì)瘤胃發(fā)酵的影響.pdf

1、本論文通過給BALB/c小鼠灌胃屎腸球菌發(fā)酵液，研究其對(duì)小鼠糞便微生物組成、血常規(guī)、淋巴細(xì)胞亞群及免疫球蛋白含量的影響，并通過體外法培養(yǎng)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞，探討灌胃屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)ConA刺激脾臟淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響。同時(shí)采用人工瘤胃裝置評(píng)價(jià)屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)瘤胃發(fā)酵的影響。 試驗(yàn)一通過測定屎腸球菌的膽汁、模擬胃液和小腸液的耐受性來評(píng)價(jià)其是否適合作為益生菌。同時(shí)選用40只BALB/c雌性小鼠，研究連續(xù)灌胃21天屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)

2、小鼠糞便微生物組成的影響。結(jié)果表明，屎腸球菌具有較強(qiáng)的膽汁耐受能力，在膽汁中培養(yǎng)60 min時(shí)，與培養(yǎng)前對(duì)比活菌數(shù)顯著增加了。并且對(duì)模擬胃液和小腸液也有一定的耐受能力，在模擬胃液和小腸液中分別培養(yǎng)60 min和120 min后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，仍能保證56.03％和92.16％以上存活。小鼠灌胃屎腸球菌發(fā)酵液后，糞便中腸內(nèi)菌的數(shù)量有顯著下降的趨勢，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)腸內(nèi)菌的數(shù)值均極顯著低于(P<0.01)對(duì)照組的數(shù)值。在屎腸球菌發(fā)酵液灌胃7和14天

3、時(shí)，小鼠糞便中總好氧菌數(shù)值極顯著高于對(duì)照組的數(shù)值，21天時(shí)，兩組數(shù)值無顯著性差異。同時(shí)小鼠灌胃屎腸球菌發(fā)酵液能夠顯著增加糞便中乳酸菌的量。其中灌胃7天時(shí)，試驗(yàn)組數(shù)值顯著高于對(duì)照組數(shù)值。當(dāng)灌胃14和21天時(shí)，小鼠糞便中乳酸菌的量極顯著高于對(duì)照組的數(shù)值。 試驗(yàn)二研究屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)小鼠外周血血常規(guī)、淋巴細(xì)胞亞群、血漿與小腸液中免疫球蛋白及脾臟淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子含量的影響。結(jié)果表明小鼠灌胃屎腸球菌發(fā)酵液后外周血中DP細(xì)胞所占比例和紅

4、細(xì)胞平均血紅蛋白濃度顯著增加，紅細(xì)胞平均體積顯著降低。但對(duì)外周血中75T細(xì)胞、NK細(xì)胞、Th細(xì)胞、Tc細(xì)胞和T細(xì)胞所占比例無顯著影響，外周血中白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)等血常規(guī)指標(biāo)也無顯著影響。灌胃屎腸球菌發(fā)酵液后小鼠血漿中l(wèi)gG含量顯著高于對(duì)照組，小腸液中l(wèi)gA含量有所升高，但差異不顯著；血漿中l(wèi)gM和lgA含量均無顯著影響。脾臟淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子數(shù)據(jù)顯示，在這個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，持續(xù)灌胃屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)IL-2的濃度無顯著影響，

5、IL-4的濃度隨著灌胃時(shí)間的增加而升高，在灌胃14天時(shí)達(dá)到最高峰，此時(shí)試驗(yàn)組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-4的濃度顯著高于對(duì)照組的數(shù)值，隨后濃度逐漸降低。小鼠脾臟淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-6和IFN-γ濃度的變化趨勢在對(duì)照組與試驗(yàn)組是一致的。對(duì)照組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中IL石和IFN-γ的濃度隨著試驗(yàn)期的延長濃度不斷增加。同時(shí)試驗(yàn)組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-6和IFN-γ的濃度隨著屎腸球菌灌胃時(shí)間的增加而升高，在灌胃14天時(shí)達(dá)到最高峰

6、，此時(shí)試驗(yàn)組這兩種細(xì)胞因子的濃度均顯著高于對(duì)照組。隨后在灌胃21天時(shí)，這兩種細(xì)胞因子的濃度開始迅速下降，此時(shí)試驗(yàn)組這兩種細(xì)胞因子的濃度顯著低于對(duì)照組. 試驗(yàn)三利用持續(xù)動(dòng)態(tài)人工瘤胃裝置，采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以不添加屎腸球菌發(fā)酵液為對(duì)照，研究了添加1.25×106和6.25x106mL-1屎腸球菌發(fā)酵液對(duì)瘤胃液pH值、微生物蛋白(MCP)、氨態(tài)氮(NH3-N)、乙酸、丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)濃度的影響。結(jié)果表明添加屎