新型pH響應性寡聚透明質酸多功能納米膠束研究.pdf

1、為了提高抗腫瘤藥物傳遞系統(tǒng)安全性以及腫瘤靶向性，智能型膠束引起了藥劑學的廣泛關注。本文主要研究具有腫瘤CD44受體靶向性及pH敏感性的多功能膠束，即不僅其對 CD44受體高表達的腫瘤細胞具有靶向性，而且在正常人體環(huán)境（pH7.4）和腫瘤細胞微環(huán)境（pH5.0~6.0）具有不同的釋放速率的納米膠束給藥系統(tǒng)。
　　本課題以寡聚透明質酸（oHA，oligomeric hyaluronic acid）作為母體載體材料，合成了兩親性聚合物寡

2、聚透明質酸-縮酮載體材料（oHM），作為藥物載體，姜黃素為模型藥物，在水中自組裝形成具有CD44受體靶向性及pH靶向性的多功能膠束。通過單因素考察實驗，選擇制備該膠束的最佳工藝，并考察膠束的理化性質。通過體外釋放試驗，考察姜黃素寡聚透明質酸-縮酮載體膠束（Cur-oHM）在不同pH條件下的釋藥速率，考察其pH敏感性。通過腫瘤細胞實驗，對寡聚透明質酸-縮酮載體（oHM）和姜黃素寡聚透明質酸-縮酮載體膠束（Cur-oHM）的細胞毒性以及安全

3、性進行評價。通過整體動物實驗，考察Cur-oHM膠束藥物動力學性質、組織分布情況以及腫瘤靶向行為，為建立高效、安全的新型抗腫瘤藥物傳遞系統(tǒng)提供理論依據(jù)和實驗基礎。
　　薄荷縮酮（MGK，Menthone1,2-glycerol ketal）與 Nα-芐氧羰基-L-組氨酸（Cbz-His，N-Cbz-L-histidine）反應生成具有芐氧羰基（Cbz）保護的薄荷縮酮與組氨酸結合物Cbz-MH，Cbz-MH進一步還原生成脫Cbz保護

4、的薄荷縮酮與組氨酸結合物 MH，其與寡聚透明質酸 oHA酰胺化生成寡聚透明質酸-縮酮載體材料oHM。采用核磁共振氫譜（1H-NMR）、質譜（ESI-MS）、紅外光譜（FT-IR）、熒光探針等手段對oHM的結構、臨界膠束濃度（CMC）進行表征測定。結果表明正確合成了目標產物oHM，其臨界膠束濃度為0.082 mg/ml。
　　采用透析法制備包載姜黃素的oHM膠束（Cur-oHM），以包封率、載藥量、粒徑等作為評價指標，篩選出最佳處方

5、，所制備的Cur-oHM膠束的包封率為58.8％，載藥量5.79%，粒徑120.60±2.81 nm，zeta電位-29.24±4.34 mv。體外釋藥特性實驗表明，Cur-oHM膠束的體外釋藥特性受 pH影響明顯，酸性條件下能夠促進其釋放速率?？疾霤ur-oHM膠束的藥物動力學性質，通過與姜黃素溶液對照制劑比較，Cur-oHM膠束可迅速向大鼠各組織分布，具有明顯的緩釋作用。小鼠組織分布實驗表明，Cur-oHM膠束主要靶向于肝和脾，在肺

6、部有一定的富集，與小鼠活體成像實驗結果基本一致。
　　考察 Cur-oHM膠束凍干粉與培養(yǎng)基的配伍穩(wěn)定性，對 MDA-MB-231乳腺癌細胞的細胞毒性以及細胞內攝取情況，實驗結果表明Cur-oHM膠束與培養(yǎng)基配伍穩(wěn)定性良好，可有效被MDA-MB-231乳腺癌細胞攝取，對MDA-MB-231乳腺癌細胞有一定的毒性，抑制其生長。分別建立CD44受體低表達MCF-7乳腺癌細胞以及CD44受體高表達A549肺癌細胞和MDA-MB-231乳