熒光原位雜交技術(FISH)檢測宮頸脫落細胞TERC基因擴增的臨床意義.pdf

1、宮頸癌為最常見的婦女惡性腫瘤之一，發(fā)病率在全球居第二位，僅次于乳腺癌。我國是宮頸癌高發(fā)國家，其中山西省為高發(fā)地區(qū)之一，且近年來發(fā)病有明顯的年輕化趨勢，嚴重威脅著女性的健康和生命。目前宮頸癌的篩查主要包括宮頸脫落細胞學檢查及HPV檢測，但各種方法都存在局限性，所以迫切需要尋找其它可靠的指標或手段來協(xié)助以上檢查。眾多研究表明，人類大多數(shù)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展常與染色體的不穩(wěn)定性有關，并有研究發(fā)現(xiàn)端粒酶的激活是宮頸癌形成的早期事件，且其激活程度與

2、宮頸病變程度呈正相關。TERC基因定位于三號染色體長臂(3q，26.3)，主要的作用是編碼端粒酶復合物中RNA成分，該成分為合成端粒重復序列的模板，是端粒酶活性必需的核心組分之一。因此，TERC基因作為端粒酶活性成分的編碼基因，對其進行檢測將有助于宮頸癌的篩查及早期診斷。目前檢測這一基因的標準方法即熒光原位雜交(FISH)技術。本課題擬通過FISH技術檢測不同程度宮頸病變中TERC基因的擴增情況，以期為宮頸癌的篩查、早期診斷及預后評估提

3、供新的途徑。 目的：評估液基細胞學檢查在宮頸病變篩查中的臨床意義，并應用FISH技術檢測不同程度宮頸病變中TERC基因的表達情況，以期為宮頸癌的篩查、早期診斷及預后評估提供新的途徑。 方法：收集2008年6月-2009年1月在山西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院婦產科門診，自愿行TCT檢查的患者資料，其中TCT陽性者(即：TBS分級系統(tǒng)在ASCUS及其以上病變者)行陰道鏡檢查并取活檢進行病理診斷。以組織病理學為金標準，與液基細胞學診

4、斷進行比較分析，評估液基細胞學的診斷價值。并于TCT陽性標本中隨機抽取標本100例做為實驗組，按細胞學檢查結果分為ASCUS、LSIL、HSIL三組，同時隨機抽取同期TCT檢查結果正常標本20例做為對照組。利用FISH技術檢測各組中TERC基因的擴增情況，觀察隨著宮頸病變程度的發(fā)展，TERC基因的表達情況及變化趨勢，并將液基細胞學檢查與FISH檢測TERC基因進行比較。統(tǒng)計學分析使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，采用x2檢驗，P＜0.05差

5、異有統(tǒng)計學意義，并以組織病理學診斷為金標準，用敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、誤診率、漏診率及總符合率等指標評價兩種方法在宮頸病變中的診斷價值。 結果： 1．共收集TCT標本4285例，TCT陽性者為462例，總陽性檢出率為10.78％。其中ASCUS/AGUS268例，占6.25％；LSIL133例，占3.10％；HSIL61例，占1.42％。行陰道鏡檢取活檢者405例，以病理檢查為金標準，計算出各組檢出率分別

6、為ASCUS25.09％(63/251)、LSIL62.37％(58/93)、HSIL96.29％(52/54)、CC100％(7/7)。各組間相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。TCT檢測CINⅡ以上病變的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、漏診率、誤診率、總符合率分別為62.5％、98.11％、90.16％、90.41％、37.5％、9.84％、85.43％；TCT檢測CINⅠ以下病變的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值

7、、漏診率、誤診率、總符合率分別為39.02％、84.30％、47.76％、78.99％、60.98％、52.24％、72.13％。表明TCT對CINⅡ以上病變的診斷價值較高。 2．利用FISH技術對對照組進行檢測后，計算每例標本中異常細胞所占比例并取平均值，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，為8％±1.3，建立了判斷TERC基因陽性擴增的閾值為10％。經FISH檢測發(fā)現(xiàn)ASCUS組、LSIL組、HSIL組中TERC基因陽性擴增率分別為19

8、.51％、34.29％、91.30％。將FISH檢測結果與病理檢查結果進行比對，發(fā)現(xiàn)組織學正常組、CINⅠ組、CINⅡ組、CINⅢ組、宮頸癌組中TERC基因陽性擴增率分別為8.47％、21.43％、40％、78.78％、100％。正常組、CINⅠ組、CINⅡ組分別與CINⅢ以上組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。FISH檢測TERC基因診斷CINⅡ以上病變的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、漏診率、誤診率、總符合率分別為72

9、.34％、89.04％、80.95％、83.33％、27.66％、19.05％、82.5％；FISH檢測TERC基因診斷CINⅠ以下病變的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、漏診率、誤診率、總符合率分別為21.42％、91.53％、37.5％、83.07％、78.57％、62.5％、78.08％。FISH檢測TERC基因對CINⅡ以上病變的診斷價值較高。 3．將液基細胞學檢查與FISH檢NTERC基因進行比較，發(fā)現(xiàn)FISH檢

10、NTERC基因診斷CINⅠ以上病變的特異性、陽性預測值、陰性預測值、總符合率均高于TCT檢查，誤診率低于TCT檢查，顯示出較好的診斷價值。 結論： 1．宮頸病變程度越高，液基細胞學檢查的檢出率越高；2．TERC基因在宮頸癌前病變和宮頸癌中異常表達，F(xiàn)ISH檢NTERC基因的陽性表達率隨宮頸病變程度的加重而增加；3．與液基細胞學檢查相比，F(xiàn)ISH檢NTERC基因具有敏感性、特異性高，誤診率低的特點，診斷價值更高；4．FIS