熒光原位雜交技術(shù)(FISH)檢測(cè)膀胱尿路上皮癌的臨床應(yīng)用研究.pdf

1、目的：建立熒光原位雜交技術(shù)(FISH)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，檢測(cè)膀胱尿路上皮癌患者尿液脫落細(xì)胞染色體的缺失和非整倍異常，了解其變異情況及相關(guān)因素，探討FISH技術(shù)非侵襲性診斷膀胱尿路上皮癌的臨床應(yīng)用價(jià)值，并與尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查相比較。
　　 方法：將20例正常人和62例血尿病人（52例尿路上皮癌和10例非尿路上皮癌）的尿液同時(shí)進(jìn)行FISH和尿脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查。FISH檢測(cè)位點(diǎn)為3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體和P16基因區(qū)帶(9p21)。其中3號(hào)

2、染色體和7號(hào)染色體為一組探針，分別以紅色（3號(hào)）和綠色（7號(hào)）為標(biāo)記顏色；P16基因和17號(hào)染色體為一組，分別以紅色(P16)和綠色（17號(hào)）為標(biāo)記顏色。計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞中紅色和綠色信號(hào)的個(gè)數(shù)，計(jì)算不同類型異常情況細(xì)胞數(shù)目的百分比。以20例正常人建立閾值，F(xiàn)ISH結(jié)果陽(yáng)性為：任意兩個(gè)以上位點(diǎn)（含兩個(gè)）出現(xiàn)異常或一個(gè)位點(diǎn)有兩種以上（含兩種）異常。統(tǒng)計(jì)分析3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體及P16區(qū)帶畸變率，并分析3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體及P16區(qū)帶

3、畸變率與患者性別年齡、腫瘤臨床分期及病理分級(jí)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：FISH及尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查診斷膀胱尿路上皮癌的敏感性分別為92.3％、15.4％(P<0.0001)，而兩者的特異性分別為80％、90％(P=1.000).FISH在Ta、T1、T2期腫瘤的敏感性分別為88.9％、92.3％、92.3％；均高于尿脫落細(xì)胞檢查的0％、14.0％、23.1％；在低級(jí)別與高級(jí)別腫瘤中的敏感性分別為88.9％、100％，均高于尿脫落細(xì)胞

4、檢查的8.3％、81.3％，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。膀胱癌患者在P16區(qū)帶存在缺失畸變，在3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體及P16區(qū)帶存在單體畸變和多體畸變。P16區(qū)帶的缺失畸變率為53.85％;3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體及P16區(qū)帶的單體畸變率分別為69.23％、82.69％、88.46％、88.46％;3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體及P16區(qū)帶的多體畸變率分別為96.15％、96.15％、86.54％、80.77％。3號(hào)、7號(hào)、17號(hào)染色體及P16區(qū)帶的