色氨酸--犬尿氨酸代謝過程和結(jié)核分枝桿菌感染免疫相關(guān)性研究.pdf

1、TryptophankrynureninemetabolismandMyeobacteriumtuberculosisinfectionimmunityThesissubmittedtoneslssUt)mattetoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomy，一一ZhangYing(CollegeofA

2、nimalScienceandVeterinaryMedicine)Supervisor：AssociateProfHuangJuanProfSunZhaogangProfShanHnQingdao，ChinaJune，2013青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要色氨酸犬尿氨酸代謝過程和結(jié)核分枝桿菌感染免疫相關(guān)性研究摘要色氨酸是人體必需氨基酸，參與多種疾病代謝過程，其中色氨酸犬尿氨酸代謝途徑會因?yàn)槟承┘膊〉陌l(fā)生而增強(qiáng)，可能導(dǎo)致免疫抑制。機(jī)體免疫

3、狀態(tài)是決定結(jié)核病發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的決定性因素，研究色氨酸犬尿氨酸代謝途徑有助于闡明結(jié)核分枝桿菌感染的生物學(xué)機(jī)制。國內(nèi)外關(guān)于結(jié)核病免疫和色氨酸代謝關(guān)聯(lián)的研究較少，本試驗(yàn)主要研究結(jié)核病患者中色氨酸及其代謝產(chǎn)物的水平變化以及免疫學(xué)特性，獲得以下研究結(jié)果：1建立同時定量檢測色氨酸(TRP)及其代謝產(chǎn)物犬尿氨酸(KYN)、喹啉酸(QA)、吡啶酸(PA)、鄰氨基苯甲酸(AA)的液質(zhì)聯(lián)用(LCMS)方法，利用標(biāo)準(zhǔn)化合物摸索其測定條件，建立標(biāo)準(zhǔn)化合物濃

4、度與峰面積的線性關(guān)系后，再對104例結(jié)核病(無其他重大合并疾病)患者以及100例健康體檢者血清進(jìn)行TI沖、KYN、PA、QA、AA定量檢測，并通過KYN／TRP比值來評價代謝過程中的IDO1活性。統(tǒng)計分析表明色氨酸以及其代謝產(chǎn)物濃度和性別、年齡因素均無明顯相關(guān)性。LCMS結(jié)果顯示結(jié)核患者TRP濃度為(meanSD)41810土：16539uIllol／L明顯低于健康對照(47898士10821)umol／L(p001結(jié)核病人血清／血漿K

5、YN濃度為(2341士0934)umol／L顯著高于健康組1699士0352umol／L；結(jié)核病人QA水平(9141士8747)umol／L和健康人群(23641369)umol／L比較顯示出明顯上升(p001)；和健康人群血清／血漿中PA(012110070)umol／L并口AA(0147士0023)umolfL水平相比，結(jié)核病人體內(nèi)PA、從濃度并未出現(xiàn)顯著變化；結(jié)核患者的KYN／TRP比值(628士336)‰相比健康人(365083

6、)％有著顯著提高(p001)。結(jié)果顯示出色氨酸犬尿氨酸途徑代謝活性的顯著增強(qiáng)和結(jié)核分枝桿菌的感染具有關(guān)聯(lián)性，并且結(jié)核感染還造成TRP消耗以及下游代謝產(chǎn)物KYN、QA蓄積，從而可能影響結(jié)核機(jī)體免疫。2利用國外文獻(xiàn)報道中引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，直接測序后比對NCBI上AADAT：IDO一1、IDO2基因序列。AADAT基因中rsl480544(C／T)、[130一l中rs35099072(G／A)、rs4613984(G／A)，rsll5833