結(jié)核分枝桿菌基因突變與耐異煙肼的相關(guān)性及其檢測(cè).pdf

1、目的：分析結(jié)核分枝桿菌katG、inhA基因突變與耐異煙肼的相關(guān)性，并通過核酸薄膜導(dǎo)流雜交技術(shù)快速檢測(cè)基因突變，初步判斷有無結(jié)核分枝桿菌感染并提示其耐藥性。
　　 方法：對(duì)貴州省遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸二科結(jié)核病區(qū)2007年6月至2008年11月期間住院病人進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、菌型鑒定及藥物敏感性試驗(yàn)，在培養(yǎng)菌落中提取細(xì)菌DNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將所有擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行DNA序列分析，并將DNA測(cè)序結(jié)果與藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比；將測(cè)序

2、中檢測(cè)到的與耐異煙肼相關(guān)的katG基因315位點(diǎn)的突變形式設(shè)計(jì)成寡核苷酸探針，并制成載有探針的薄膜，對(duì)上述87例標(biāo)本中存在。katG基因315位點(diǎn)突變的18例菌株和15例katG基因野生型菌株共33例進(jìn)行雜交測(cè)試。
　　 結(jié)果：87例菌株經(jīng)鑒定均為結(jié)核分枝桿菌，30（34.5％）例為耐異煙肼菌株，57（65.5％）例為異煙肼敏感菌株；87株結(jié)核分枝桿菌菌株中共21株（24.1％）出現(xiàn)katG基因突變，其中18株出現(xiàn)在315位點(diǎn)；

3、24例（27.6％）出現(xiàn)inhA基因突變：8例（9.2％）顯示雙基因聯(lián)合突變。30例耐異煙肼株中，18（60％）株出現(xiàn)katG和（或）inhA基因突變，12株未出現(xiàn)此兩基因突變；18株中有9（50％）株為katG單基因突變，5（27.8％）株為inhA單基因突變，4（22.2％）株為katG和inhA雙基因聯(lián)合突變。katG基因兩個(gè)新突變位點(diǎn)（Va1230Met和Pro232Gln）為國(guó)內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)，已被美國(guó)，歐洲和日本的基因庫收錄。雜