ERβ在卵巢癌細胞中的表達及與ERK1-2的相關(guān)性.pdf

1、目的：卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展可能與雌激素及其受體相關(guān)，雌激素受體β(Estrogen Receptorbeta，ERβ)為近些年來備受關(guān)注的雌激素受體，在腫瘤中發(fā)揮重要作用。細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(extrallular signal regulated protein kinase，ERK1/2)為調(diào)控腫瘤細胞增殖的重要通路，在促進細胞增殖，抑制細胞凋亡，誘導(dǎo)卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本研究利用體外實驗，研究ERβ與ERR1/2在

2、卵巢癌細胞中的表達及關(guān)系，旨在探討兩者在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為卵巢癌的早期診斷及治療提供了一定的實驗基礎(chǔ)。
　　 方法：1.用不同濃度的17β-E2（10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L、10-4mol/L）分別培養(yǎng)細胞5min、15min、30min、60min、120min，MTT法檢測卵巢癌細胞增殖率，選擇17β-E2的最佳濃度和時間。
　　 2.用ERβ激動劑DPN(0.01μ mol

3、/L)和ERK1/2抑制劑U0126（10μ mol/L）聯(lián)合17β-E2(10-6mol/L)分別處理細胞1h、6h，及單獨使用DPN（0.01μ mol/L和1μ mol/L）和U0126(10μ mol/L和20μ mol/L)分別處理細胞24h，用RT-PCR分別檢測ERβ mRNA、ERK1mRNA、ERK2mRNA的表達，用蛋白免疫印記法檢測ERβ和p-ERK1/2蛋白表達。
　　 結(jié)果：1.濃度分別為10-10mo

4、l/L、10-8mol/L、10-6mol/L、10-4mol/L的17β-E2作用細胞60min時，細胞的增值率分別為(4.9±0.2、5.1±0.2、5.7±0.23、3.3±0.23)，均高于其他時間(5min，15min，30min，120min)，p=0.000。時間為60 min時，17β-E2在濃度為10-6 mol/L，細胞增殖率最高(5.7±0.23)，與其他濃度的細胞增殖率(4.9±0.2、5.1±0.2、3.3±0

5、.23)相比，p=0.000。得出17β-E2在濃度為10-6mol/L，時間為60 min時細胞增殖率最高。
　　 2.用DPN、U0126處理細胞后，ERβ mRNA表達逐漸增高。ERK1mRNA、ERK2mRNA表達逐漸降低。ERβ蛋白表達逐漸增高。p-ERK1/2蛋白表達逐漸降低。
　　 3.ERβ mRNA與ERK1/2mRNA的表達成負相關(guān)，r=-0.886，r=-0.943(p＜0.05)。ERβ蛋白與p-

6、ERK1/2蛋白表達為負相關(guān)r=-0.943，r=-0.829(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：1.ERβ在卵巢癌細胞中低表達，DPN及U0126均能促進其表達。2.ERK1/2在卵巢癌細胞中高表達，DPN及U0126均能抑制其表達，故阻斷ERK1/2通路可作為治療惡性腫瘤的靶點。3.用DPN及U0126處理細胞后，ERβ表達增加的同時，ERK1/2表達降低，且兩者有相關(guān)性。表明ERβ與ERK1/2通路間可能存在一個交匯點，即ER