中國多系統(tǒng)萎縮患者臨床特點、血漿alpha-synuclein蛋白表達(dá)水平及SNCA基因多態(tài)性研究.pdf

1、背景:
　　 多系統(tǒng)萎縮(Multiple System Atrophy，MSA)是一種少見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，臨床表現(xiàn)為自主神經(jīng)功能障礙，不典型帕金森癥狀、小腦性共濟(jì)失調(diào)等。該病的病理學(xué)特征為中樞神經(jīng)系統(tǒng)存在大量的以α-突觸核蛋白(alpha-synuclein)為主要成份的膠質(zhì)細(xì)胞胞漿包涵體(glial cytoplasmic inclusions，GCIs)。早期的研究資料將MSA分為橄欖腦橋小腦萎縮、紋狀體黑質(zhì)變性和S

2、hy-Drager綜合征三型。2008年Gilman等提出新的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并將MSA分為帕金森癥狀型(MSA-P)和小腦共濟(jì)失調(diào)型(MSA-C)兩型。國外報道MSA平均發(fā)病年齡約為55歲，無性別差異。歐洲MSA研究小組認(rèn)為MSA亞型中，MSA-P占68％，MSA-C占32％。但是，日本MSA患者中MSA-C占83.8％，而MSA-P只有16.2％。α-突觸核蛋白是一種功能未知的突觸核蛋白，在帕金森?。≒arkinson disease，P

3、D）、路易體癡呆(Dementia with Lewy bodies，DLB)和MSA的發(fā)病過程起重要作用。研究報道，α-突觸核蛋白可以分泌到細(xì)胞外，如腦脊液、血漿等。因此通過科學(xué)方法檢測血漿中α-突觸核蛋白作為MSA的生物標(biāo)志物，對于MSA早期診斷、預(yù)后評估等可能具有重要意義。Lee等發(fā)現(xiàn)韓國PD患者和基于Quinn診斷標(biāo)準(zhǔn)的MSA患者血漿中α-突觸核蛋白水平較對照組明顯升高，并且PD組較MSA組升高更加明顯。MSA病因尚不清楚，目前

4、認(rèn)為MSA為環(huán)境及遺傳因素共同作用的結(jié)果。遺傳因素方面研究最多的是α-突觸核蛋白的編碼基因SNCA。2009年，Scholz等在高加索MSA人群中發(fā)現(xiàn)SNCA基因rs11931074和rs3857059等多態(tài)位點與MSA發(fā)病有關(guān)。但是最近，rs11931074在韓國MSA人群并未發(fā)現(xiàn)與MSA疾病有關(guān)。
　　 MSA疾病確診依賴病理學(xué)證據(jù)，僅依賴MSA典型的臨床表現(xiàn)，在疾病早期極易誤診或漏診。目前，我國MSA疾病系統(tǒng)性研究較少，研

5、究，研究我國MSA患者臨床特征，探索MSA疾病診斷的生物標(biāo)志物及了解我國MSA患者與國外MSA患者的遺傳差異，具有重要的意義。
　　 目的:
　　 1、隨訪2002年2月-2011年2月在中南大學(xué)湘雅醫(yī)院、湘雅二院、湘雅三院神經(jīng)內(nèi)科首診為MSA的患者，嚴(yán)格按照2008年Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行重新評估，進(jìn)一步完善國內(nèi)MSA疾病流行病學(xué)相關(guān)資料;
　　 2、收集符合Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)的MSA患者血漿，檢測血漿

6、α-突觸核蛋白表達(dá)水平，探索血漿α-突觸核蛋白在MSA診斷及病情評估中的意義;
　　 3、驗證SNCA基因rs11931074和rs3857059在中國MSA患者人群及正常人群中的分布情況。
　　 方法:
　　 1、嚴(yán)格按照2008年Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)，對2002年2月至2011年2月湘雅醫(yī)院、湘雅二院和湘雅三院首診考慮MSA患者共107例進(jìn)行隨訪，臨床診斷排除MSA16例，失訪9例，根據(jù)Gilman新診斷標(biāo)

7、準(zhǔn)共有82例被診斷為MSA患者，統(tǒng)計比較MSA患者臨床特點，并利用UMSARS-Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和蒙特利爾認(rèn)知表北京版進(jìn)行評估;
　　 2、收集符合Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)的MSA患者血漿，使用ELISA試驗方法檢測患者及對照組血漿α-突觸核蛋白表達(dá)水平;
　　 3、運用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)，6％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和DNA測序的方法檢測82例符合Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)的MSA患者及100例正常人α-突觸核蛋白編碼基因S

8、NCA多態(tài)位點rs11931074和rs3857059的各等位基因分布頻率和基因型分布頻率。
　　 結(jié)果:
　　 1、隨訪的107例患者中臨床診斷排除16例，失訪9例，共有82例患者符合Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中MSA-P型28例(34.15％)，MSA-C型54例(65.85％);男性患者59例，女性患者23例，男女之比為2.57∶1;MSA平均發(fā)病年齡為52.96±7.00(33～68)歲，MSA-P和MSA-C亞

9、型之間發(fā)病年齡無統(tǒng)計學(xué)差異;50例首發(fā)癥狀為小腦共濟(jì)失調(diào)癥狀，8例首發(fā)癥狀為帕金森癥狀，14例以較明確的自主神經(jīng)系統(tǒng)癥狀起病，另有10例以肢體無力癥狀為首發(fā)癥狀，其中MSA-P型8例，MSA-C型2例。伴隨癥狀中睡眠障礙和性功能障礙在MSA患者中多見，而暈厥、靜止性震顫和錐體束征在兩亞型中較少見。MSA患者病程與UMSARS-Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ呈正相關(guān);MSA患者蒙特利爾認(rèn)知表得分明顯低于PD患者和正常對照組，提示MSA患者可能伴有認(rèn)知功能損傷

10、;
　　 2、MSA患者組血漿α-突觸核蛋白濃度明顯高于正常對照組，并且血漿α-突觸核蛋白濃度與UMSARS-Ⅱ評分呈負(fù)相關(guān);MSA-P和MSA-C亞型間血漿α-突觸核蛋白濃度無顯著性差異;
　　 3、MSA患者組和正常對照組SNCA基因rs11931074和rs3857059等位基因頻率及基因型頻率分布無顯著性差異。
　　 結(jié)論:
　　 1、根據(jù)Gilman新診斷標(biāo)準(zhǔn)，在國內(nèi)開展較大規(guī)模的MSA疾病流行