βAR-cAMP通路通過(guò)上調(diào)Mfn2抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖.pdf

1、目的：研究β腎上腺素受體（adrenergic receptor，AR）-腺苷酸環(huán)化酶（adenylate cyclase，AC）-環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）信號(hào)通路對(duì)血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）增殖和線粒體融合蛋白2（mitofusin2，Mfn2）及其下游信號(hào)分子表達(dá)的影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)大鼠VSMC，給予

2、不同濃度的（5μM、10μM、25μM、50μM）的異丙腎上腺素（isoprenaline，ISO）處理，用細(xì)胞計(jì)數(shù)、水溶性四甲基偶氮唑鹽（WST-1）法觀察ISO對(duì)VSMC增殖的影響；不同濃度（5μM、10μM、25μM、50μM）福司柯林(forskolin，F(xiàn)SK)處理VSMC，Western blot方法檢測(cè)兩種處理方法對(duì)Mfn2、磷酸化Raf-1（p-Raf-1）和磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）表達(dá)的影響；小干擾RNA

3、（small interfering RNA，siRNA）沉默Mfn2，Western blot觀察各組Mfn2、p-ERK1/2的變化。
　　 結(jié)果：細(xì)胞計(jì)數(shù)及WST-1顯示，ISO抑制VSMC增殖，呈濃度依賴性；Western blot結(jié)果顯示，ISO及forskolin均可上調(diào)Mfn2表達(dá)，呈濃度依賴性增高，對(duì)p-Raf-1和p-ERK1/2的表達(dá)均呈濃度依賴性降低，Mfn2沉默能夠拮抗ISO介導(dǎo)的p-ERK1/2抑制作用