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文檔簡介
1、目的:研究斑蝥素對人白血病HL60細胞株端粒酶逆轉錄酶mRNA表達的影響及啟動子甲基化的作用,以期闡明斑蝥素抗白血病的機制是否與其通過調控hTERT啟動子甲基化水平來調節(jié)hTERT表達有關。方法:采用MTT法證實斑蝥素抑制HL60細胞株增殖的確切作用;倒置顯微鏡觀察藥物作用后的腫瘤細胞形態(tài)并攝片;采用RT-PCR半定量法檢測不同濃度斑蝥素對HL60細胞株端粒酶逆轉錄酶(hTERT) mRNA的表達情況的影響;利用甲基化特異性聚合酶鏈反應
2、(MSP)的方法,用亞硫酸氫鈉修飾后的DNA為模板進行聚合酶鏈反應(PCR),檢測不同濃度斑蝥素對HL60細胞株hTERT啟動子甲基化作用情況。結果:斑蝥素可抑制HL60細胞增殖,具有明顯的時間和劑量效應;空白組與中劑量斑蝥素組之間、空白組與高劑量斑蝥素組之間以及中高劑量斑蝥素組之間hTERTmRNA的相對表達量比較均具有顯著差異性(P＜0.01);中劑量斑蝥素組、高劑量斑蝥素組均能降低hTERTmRNA的相對表達量(P＜0.01);高
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